ISSR ( inter simple sequence repeat) 又稱簡單重復序列間擴增，是近年來發展起來的一類新型的分子標記技術。該技術根據植物基因組中豐富的簡單重復序列設計單一引物,對基因組DNA進行擴增,利用了RAPD技術的優點和基因組中豐富的SSR序列信息,具有操作簡單、可靠性強、重復性高、DNA模板用量少、不需預先設計引物的特點,可用來揭示樣本間的遺傳多樣性。

   1）PCR-ISSR實驗路線

    前期確認階段：試驗樣本類型，數量，引物，簽訂試驗合作合同；

    試驗費用：DNA提取30元一個樣本，PCR+電泳檢測10元一個反應，分析單獨收費（視工作量而定）；23個樣本，10對引物包括引物篩選試驗費用大約4000元。

    試驗階段：DNA提取，PCR擴增，電泳檢測

    數據分析：和客戶詳細溝通，確認分析方案：讀取01矩陣；聚類分析；多樣性分析；多態位

              點數(AP)、多態位點百分率( P)、平均等位基因數(Na)、有效等位基數(Ne)、

              Nei′s基因多樣性指數(H)、Shannon′s信息指數(I) 、遺傳分化度(Gst)等。

              利用NTSYS進行聚類分析。

    2）客戶提供：

       ★  基因組DNA：

          ●濃度為50-100ng/μL；（每個位點用2-3LμL,請根據引物數計算總體積）

          ●2%瓊脂糖電泳檢測有DNA主帶，沒有降解；

          ●DNA經過DNA純化試劑盒或磁珠純化；

          ●DNA需溶解在TE或滅菌的去離子水里；

          ●DNA溶解后，肉眼看不到雜色；

       ★ 植物材料： 新鮮組織，葉片采用硅膠干燥后或干冰運輸；

       ★ 動物材料： 新鮮組織，無水乙醇封存低溫運輸；

      北京博友順生物技術有限公司，經過幾年的發展公司更專業于分子標記技術服務。公司致力于：基因組SSR引物開發、AFLP檢測、SSR/STR技術服務、ISSR、MSAP、SNP基因分型、條形碼分析、克隆分子實驗。本著“質量第一，服務至上”的原則為各大院校、醫院、科研院所等單位，提供優質的產品和服務，最大程度的滿足用戶的需要。

       公司感謝廣大老師五年來對公司的厚愛和支持，將再接再厲為廣大老師做好科研后勤工作。我們非常慶幸能成長在生物行業剛剛起航的年代里，能跟隨各位老師前輩們共進步、共成功