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抗體熱穩定性測定的意義及方法

瀏覽次數:316 發布日期:2025-3-28  來源:百泰派克生物科技

抗體熱穩定性測定是確定抗體在升溫過程中的穩定性,識別其熱變性溫度(Tm),即抗體開始失去結構穩定性的溫度點,以及評估在特定溫度下的長期穩定性。抗體的熱穩定性直接影響其生物學活性和功能性,對于藥物開發、診斷試劑和研究應用而言至關重要。

 

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圖1

二、常用方法

1.差示掃描量熱法(DSC):

  • 原理:測量在加熱過程中,樣品與參照物之間的熱流差異,以確定抗體蛋白質的熱變性溫度。
  • 應用:準確地評估抗體的熱穩定性和變性溫度,適用于抗體工程和配方開發。


2.圓二色光譜(CD)分析:

  • 原理:利用蛋白質在特定波長下的圓偏光吸收差異,來監測蛋白質二級結構的變化。
  • 應用:評估抗體在不同溫度下的結構變化,了解其穩定性特性。


3.表面等離子共振(SPR):

  • 原理:監測抗體與特定抗原結合的親和力變化,來評估溫度對其功能性的影響。
  • 應用:分析抗體在不同溫度條件下的功能穩定性。


4.熒光光譜法:

  • 原理:通過測定蛋白質內部色氨酸和酪氨酸殘基的熒光強度變化,監測蛋白質結構的變化。
  • 應用:快速評估抗體的熱穩定性,適用于初步篩選和比較不同抗體或配方的穩定性。


5.動態光散射(DLS):

  • 原理:測量抗體溶液中粒子大小分布的變化,以評估溫度對其聚集狀態的影響。
  • 應用:了解抗體在不同溫度條件下的聚集趨勢。


實驗設計考慮因素

  • 樣品準備:確保抗體樣品的純度和濃度適合所選的分析方法。
  • 溫度范圍:選擇覆蓋抗體可能穩定和不穩定區域的溫度范圍。
  • 數據分析:利用適當的軟件和統計方法,準確解讀實驗數據,得出有意義的結論。
發布者:北京百泰派克生物科技有限公司
聯系電話:010-67869385
E-mail:market@biotech-pack.com

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