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CHOZN®-GS平臺結合UCOE®技術構建穩定高產的工業細胞

瀏覽次數:4945 發布日期:2020-7-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
上游工藝精選 | CHOZN®-GS平臺結合UCOE®技術,助力構建穩定高產的工業細胞
  
生物制藥過程中非常關鍵的一步是找到一個好的克隆, 通常它是從我們構建完成的細胞池里通過MTX或MSX壓力的篩選獲得我們所希望的高表達,質量符合要求的單克隆株,這是一個相當需要技術、經驗、人力和時間過程。
 

▲圖一:傳統細胞株開發流程
 
CHOZN®-GS平臺
 
它通過提供先進的平臺技術助力生物制藥工藝開發,該平臺包括CHOZN®-GS細胞株,該細胞株是通過ZFNs(鋅指核酸酶)技術敲除了谷氨酰胺合成酶基因,使得細胞株的存活依賴于外源谷氨酰胺的補充。該特性可以被視為強有力的篩選原理,使得整個篩選過程無需通過加MTX或MSX壓力便可獲得高表達的目的克隆。
 
操作簡單、節約人力、時間成本。同時該平臺還包括相應的培養基,具有指導意義的數據以及詳細的操作手冊,幫助操作者簡單快速的獲得目的克隆并放大到一定規模。
 

▲圖二:CHOZN®-GS細胞株開發流程
 
 
同時默克還提供另一種助力快速獲得高表達單克隆技術---UCOE®
 
UCOE®是一種普適性染色質開發組件——它們是天然DNA序列與管家基因的啟動子區域有關。他們被證實能夠減少甲基化,保持開放的染色質結構,允許高穩定的表達。
 
UCOE®技術是可以用來做任何位點的一個所謂的好位點。
 

▲圖三:UCOE®基因及質粒
 
我們在96孔板中通過數百組的Mini-pool評估了UCOE®所帶來的益處,可以很明顯的看出采用UCOE®質粒能大大的提高高表達克隆的形成率,進而能夠很大程度上節約我們獲得高表達克隆的時間。
 

▲圖四:Non-UCOE®與UCOE®對高表達克隆率的影響
 

▲圖五:CHOZN®-GS結合UCOE®克隆生長及產物表達 
 

▲圖六:CHOZN®-GS結合UCOE®克隆3L反應器驗證
 
通過以上的實驗和數據,我們可以看到UCOE®技術提高了穩定高產克隆的產生率,可減少用于細胞系開發所需的時間和資源,平臺化的流程可以加快規模放大和工藝開發路徑。
 
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發布者:默克生命科學
聯系電話:400-900-3055轉8
E-mail:3538241589@qq.com

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