活體電穿孔法在基因治療方面的應(yīng)用(一)
活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導(dǎo)入動(dòng)物目標(biāo)組織或器官。這種方法能有效導(dǎo)入外源基因，可在多種組織器官上應(yīng)用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細(xì)胞膜表面產(chǎn)生疏水或親水的微小通道105～115μm ,這種通道能維持幾毫秒到幾秒,然后自行恢復(fù)。在此期間生物大分子如DNA 可通過這種微小的通道進(jìn)入細(xì)胞 。近年來活體電穿孔法用于轉(zhuǎn)基因研究的報(bào)道不斷增多,在基因治療方面的優(yōu)勢也日趨顯著,是一種很好的活體基因?qū)敕椒ā?/FONT>
原來在基因治療中利用活體電穿孔法將抗體或化療藥物導(dǎo)入腫瘤中,促進(jìn)抗體和化療藥物的運(yùn)送來進(jìn)行治療,現(xiàn)在則以特異的外源基因替代了抗體的應(yīng)用,簡化操作步驟同時(shí)降低了費(fèi)用。
首先,在皮膚瘤和腦瘤的治療中,電穿孔法可有效地將藥物基因?qū)胫委煵课弧ｋ姶┛追▽?dǎo)入人單核細(xì)胞趨化物蛋白基因到大鼠腦瘤后,該蛋白在腫瘤的局部表達(dá),同時(shí)在基因?qū)氲牟课豢捎^察到巨噬細(xì)胞和白細(xì)胞的聚集。
同時(shí)有科學(xué)家從另一角度研究電穿孔對治療腫瘤方面的作用,利用高電場強(qiáng)度的陡脈沖促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生不可逆性電擊穿而最終死亡,這種方法很適于局部組織腫瘤的治療。
此外,活體電穿孔法還可以參與癌癥的治療,通過活體電穿孔法將基因?qū)霗C(jī)體后,導(dǎo)入組織可成為分泌抗體等物質(zhì)的臨時(shí)分泌器官,以抵抗癌細(xì)胞的侵蝕或代償由于癌細(xì)胞的侵蝕而造成的機(jī)體多種生理機(jī)能的喪失。
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