成年大小鼠心肌細胞分離操作方法的技術(shù)改進歷程匯總
近年來，隨著心臟電生理研究的不斷深入和細胞分子生物學(xué)在心血管研究領(lǐng)域的不斷普及，成年大小鼠心肌細胞已廣泛用于成熟心肌細胞離子通道、蛋白免疫化學(xué)、心肌病及心肌梗塞等模型的實驗研究中。成熟心肌細胞不僅在結(jié)構(gòu)和功能上更接近在體細胞，并且成熟心肌細胞的體外培養(yǎng)模型可以排除成纖維細胞對實驗結(jié)果的干擾。
心臟由心肌細胞和間質(zhì)細胞組成。心肌細胞占心臟總體積的75%,但細胞數(shù)僅占心臟細胞總數(shù)的1/3。出生后心肌細胞喪失增值能力，是高度分化的終末細胞，主司收縮功能。間質(zhì)細胞由成纖維細胞、血管平滑肌細胞、神經(jīng)細胞及巨噬細胞等組成。成纖維細胞占間質(zhì)細胞90%以上，成纖維細胞具有分泌功能，合成和分泌生物活性物質(zhì)，調(diào)節(jié)自身膠原的產(chǎn)生及周圍心肌細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能。
心肌細胞按生理功能分為兩類:一類為工作細胞,包括心房肌及心室肌,胞漿內(nèi)含有大量肌原纖維,因而具有收縮功能,主要起機械收縮作用。除此以外,還具有興奮性、傳導(dǎo)性而無自律性。另一類為特殊分化的心肌細胞,包括分布在竇房結(jié)、房間束與結(jié)間束、房室交界、房室束和普肯耶纖維中的一些特殊分化的心肌細胞,胞漿中沒有或很少有肌原纖維,因而無收縮功能,主要具有自律性,有自動產(chǎn)生節(jié)律的能力,同時具有興奮性、傳導(dǎo)性。無論工作細胞還是自律細胞,其電生理特性都與細胞上的離子通道活動有關(guān),跨膜離子流決定靜息膜電位和動作電位的形成。
1969年Kono和Powell等先后應(yīng)用酶解法對成年大鼠心肌細胞進行分離，1977年Jacobson成功進行了成年大鼠心肌細胞的培養(yǎng)。龍西林等于1991年率先在國內(nèi)分離出成年大鼠心肌細胞。成年大小鼠心肌細胞的分離與培養(yǎng)難度較大，酶解法用于成年鼠心肌細胞的分離已有近五十年的歷史，但至今仍無統(tǒng)一方法可循。目前對于成年鼠心肌細胞的研究主要集中于大鼠心肌細胞，小鼠心肌細胞的分離與培養(yǎng)難度更高。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的興起，以及siRNA與microRNA等方面調(diào)控研究的不斷深入，對于體外分離的成年鼠心肌細胞的活性和成活率有了更高要求，這也對成年大小鼠心肌細胞分離和培養(yǎng)提出更高要求。齊氏生物在總結(jié)前人方法的基礎(chǔ)上，應(yīng)用改良的Langendolf方法進行心臟多次灌流，分離得到的大小鼠心肌細胞純度高，成活率高，可用于心血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實驗的要求。
文章鏈接：http://www.chiscientific.cn/wenxiandetail.aspx?ID=292
圖1.心臟結(jié)構(gòu)圖
心臟由心肌細胞和間質(zhì)細胞組成。心肌細胞占心臟總體積的75%,但細胞數(shù)僅占心臟細胞總數(shù)的1/3。出生后心肌細胞喪失增值能力，是高度分化的終末細胞，主司收縮功能。間質(zhì)細胞由成纖維細胞、血管平滑肌細胞、神經(jīng)細胞及巨噬細胞等組成。成纖維細胞占間質(zhì)細胞90%以上，成纖維細胞具有分泌功能，合成和分泌生物活性物質(zhì)，調(diào)節(jié)自身膠原的產(chǎn)生及周圍心肌細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能。
圖2.心臟細胞組成
心肌細胞按生理功能分為兩類:一類為工作細胞,包括心房肌及心室肌,胞漿內(nèi)含有大量肌原纖維,因而具有收縮功能,主要起機械收縮作用。除此以外,還具有興奮性、傳導(dǎo)性而無自律性。另一類為特殊分化的心肌細胞,包括分布在竇房結(jié)、房間束與結(jié)間束、房室交界、房室束和普肯耶纖維中的一些特殊分化的心肌細胞,胞漿中沒有或很少有肌原纖維,因而無收縮功能,主要具有自律性,有自動產(chǎn)生節(jié)律的能力,同時具有興奮性、傳導(dǎo)性。無論工作細胞還是自律細胞,其電生理特性都與細胞上的離子通道活動有關(guān),跨膜離子流決定靜息膜電位和動作電位的形成。
圖3成年大鼠心肌細胞（來源：齊氏生物）
1969年Kono和Powell等先后應(yīng)用酶解法對成年大鼠心肌細胞進行分離，1977年Jacobson成功進行了成年大鼠心肌細胞的培養(yǎng)。龍西林等于1991年率先在國內(nèi)分離出成年大鼠心肌細胞。成年大小鼠心肌細胞的分離與培養(yǎng)難度較大，酶解法用于成年鼠心肌細胞的分離已有近五十年的歷史，但至今仍無統(tǒng)一方法可循。目前對于成年鼠心肌細胞的研究主要集中于大鼠心肌細胞，小鼠心肌細胞的分離與培養(yǎng)難度更高。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的興起，以及siRNA與microRNA等方面調(diào)控研究的不斷深入，對于體外分離的成年鼠心肌細胞的活性和成活率有了更高要求，這也對成年大小鼠心肌細胞分離和培養(yǎng)提出更高要求。齊氏生物在總結(jié)前人方法的基礎(chǔ)上，應(yīng)用改良的Langendolf方法進行心臟多次灌流，分離得到的大小鼠心肌細胞純度高，成活率高，可用于心血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實驗的要求。
文章鏈接：http://www.chiscientific.cn/wenxiandetail.aspx?ID=292
- 翼和生物SNP基因分型技術(shù)：揭秘基因密碼，探尋寶寶健康之路
- 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）在探索肥胖機制中的研究
- 泌尿系統(tǒng)疾病的關(guān)鍵治療靶點之V2R的介紹及相關(guān)實驗
- 激光共聚焦顯微鏡助力腫瘤抑制劑研究
- 空間多組學(xué)解碼腫瘤微環(huán)境，助力加速精準(zhǔn)治療研究
- 利用單細胞轉(zhuǎn)錄組技術(shù)解析多種免疫細胞對大量細胞因子的響應(yīng)
- Emulate器官芯片助力研究藥物引起肝損傷的機制
- 骨質(zhì)疏松和甲狀旁腺功能減退關(guān)鍵靶點PTH1R的結(jié)構(gòu)功能及相關(guān)實驗介紹
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com