引言：上海吉凱基因化學技術有限公司成立于2002年，擁有國內最大的慢病毒文庫，同時也是國內最大的疾病關鍵基因科研服務供應商，在疾病研究領域的實驗積累已逾14年！在這里，我們為大家特別整理了10多個研究領域的經驗所得，將最實用的精華分享給大家！上一期幫大家總結了胃癌研究中體內外模型的選擇，以及病毒工具的應用，本期我們來看看同屬消化系統的結直腸癌又有哪些特別的的地方呢。
結直腸癌(colorectal cancer, CRC)是消化系統最常見的惡性腫瘤之一。近年來，結直腸癌的發病率隨著生活水平的提高一直保持穩定增長的態勢。相關數據顯示，結直腸癌發病率在中國惡性腫瘤發病率中排名第三，并呈逐步上升趨勢。與肺癌、胃癌不同，結直腸癌患者中40%~50%在初診時已有遠處轉移，即使接受了根治性手術切除的患者，最終仍然會有50%以上出現復發轉移。
進入21世紀以來，表皮生長因子受體( Epidermal growth factor receptor，EGFR) 及血管內皮生長因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）靶向藥物成為轉移性結直腸癌（mCRC） 治療的一個突破，對此類藥物相關基因的研究也推動了結直腸癌個體化治療的進程。目前，探尋結直腸癌的發病及轉移機制、尋找靶向單抗藥物療效的預測因子、以及探索以鉑類藥物為代表的化療藥物耐藥機制是結直腸癌研究的幾大熱點。俗話說的好“磨刀不誤砍柴工”，今天就給大家聊一聊結直腸癌研究中體內外模型的選擇，以及病毒工具的應用。
一、我需要哪種細胞模型？是否易于操作？
結直腸癌中，基因組變異方向的研究已經非常扎實。Kras基因突變已被鑒定為預測西妥昔（Cetuximab）療效的生物學標志物。而在其他大部分病例中，BRAF、TP53等基因突變可見于結直腸癌不同的發展階段，MSI（microsatellite instability）也是結直腸癌中常見變異。如何讓基礎研究更加貼近您的臨床問題？有兩個問題一定要注意：1.所用的細胞、動物模型是否符合疾病的特征；2.如何在模型中根據實驗需要，對目的基因進行有效的操作。
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二、細胞實驗效果不錯，那動物實驗怎么做？
動物模型可在在腫瘤基礎性研究和抗腫瘤研究中發揮重要作用。結直腸癌研究中動物實驗主要分為三種類型：I自發結直腸癌模型；II誘導結直腸癌模型；III 移植結直腸癌模型。第I種主要是通過構建轉基因動物的方式實現，第II種則利用化學誘導劑誘導結直腸癌發生，但是誘導模型不便于研究腫瘤的侵襲和轉移能力；第III種將人類腫瘤組織或細胞直接接種于裸鼠進行研究。因裸鼠培育條件低，無毛，易于動態觀察腫瘤的生長狀態，且通過接種方式、部位的選擇可達到較滿意的轉移效果，因此目前多選擇裸鼠進行人結直腸癌細胞異體移植。
據數據統計，約30%的CRC患者發生肝臟轉移，這也是造成CRC患者死亡的最主要原因。今天我們就來著重看一看，結直腸癌轉移模型的構建吧。
注：增殖方向體內模型為裸鼠皮下成瘤，屬于腫瘤研究的常用模型，今天就不做詳細介紹了。實驗方法可參考前兩期肺癌、胃癌的總結文章。
三、體內外模型選好了，那么我的實驗需要使用哪種慢病載體對基因進行操作呢？
啟動子、熒光標記、抗性標簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實驗不同，這些元件也需要相應變化。對于腸癌研究來說，人腸上皮細胞表面抗原基因A33啟動子，可作為組織特異性啟動子使用。按例祭出神圖一張，定制你的專屬載體，就是這么簡單！
上海吉凱基因化學技術有限公司成立于2002年，擁有BSL-2級別的慢病毒包裝實驗室。病毒生產線通過ISO9001質量管理體系驗證，月均定制基因病毒產品包裝超過1000次。慢病毒生產采用6項QC檢測、病毒純度分級純化以及病毒滴度絕對定量檢測確保病毒質量。
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