Dr.J來談談“關節炎中滑膜方向的細胞模型”
為了跟前文“關節炎中軟骨破壞方向的細胞模型”相對應，這里標題還用了“關節炎”這個描述，但其實，關節炎中涉及滑膜炎癥的主要是類風濕關節炎（rheumatoid arthritis,RA）。也是關節炎中研究最廣泛的類型之一。
在類風濕關節炎發病進展中，至少涉及三大類細胞，免疫細胞，骨細胞，滑膜細胞。免疫細胞種類很多，我們暫不討論。骨細胞，最重要的病理進程就是軟骨消失，這個方向的研究參考前文“關節炎中軟骨破壞方向的細胞模型”。滑膜細胞，滑膜細胞在病理進程中是如何改變，從而參與到疾病發生發展的呢，滑膜增生，分泌炎癥因子。
臨床科研課題設計第一步，確定細胞模型和檢測指標。如果類風濕關節炎研究中確定了細胞模型為滑膜細胞的話，檢測指標有兩個方向，滑膜增生，增殖方向。分泌炎癥因子，炎癥因子分泌方向。
增殖，是細胞行為指標。炎癥因子分泌，為分子marker指標（以分子marker為檢測指標的文章，看“風靡里約奧運的拔火罐，咱搞個課題研究吧”中nature medicine的文章）。
今天一共分享4篇文章，涉及兩種滑膜細胞株，兩種檢測指標方向。
細胞模型：MH7A。檢測指標：炎癥因子。
研究的結論是二氫睪酮通過AR受體到NFKB通路抑制滑膜細胞在IL1a和TNFa刺激下的炎癥因子分泌。
類風濕關節炎發病女的比男的多，跟紅斑狼瘡這類自身免疫病類似。不過，要是用二氫睪酮來治療的話，額，女變男的變性方案就是這么做的。所以，研究結果不錯，臨床應用前景不大。研究藥物的筒子，一定要注意這個點。
因為在類風濕關節炎發病進程中IL1a與TNFa發揮了促炎癥及促軟骨消失的作用（軟骨方向可用這兩個刺激條件）。所以，這篇文章的刺激條件就用這兩個。
在MH7A細胞中，加入IL-1a或TNFa刺激后，再加入DHT作為治療藥物，以IL-8，IL-6，IL-1b這些炎癥因子作為檢測指標，發現DHT可以抑制IL-1a或TNFa刺激滑膜細胞分泌炎癥因子。
PS:這篇文章的圖3圖4圖5，大家可以借鑒下，是把熒光素酶接在相應的炎癥因子啟動子后面，這種構建，其實是篩選藥物或者新功能基因的方案。
細胞模型：MH7A。檢測指標：炎癥因子。
刺激條件用的TNFa。前面說DHT上臨床前景不是很好，這篇文章做的是Genistein，大豆來源哦。
在MH7A細胞中，加入TNFa刺激后，以IL-8，IL-6，IL-1b為檢測指標，發現Genistein可以抑制炎癥因子的分泌。
本文其他的內容是探討藥物下游的機制，信號通路。
細胞模型：HFLS-RA。檢測指標：炎癥因子。
研究的藥物是baicalin，黃芩苷，從中藥黃芩中提取的一種單體。
HFLS-RA是來源于類風濕關節炎的細胞，本身可作為疾病細胞，所以，這篇文章沒有加刺激條件，直接在這個細胞看藥物的作用。發現，加入藥物后，炎癥因子TNFa和IL-1b下降，呈濃度梯度依賴。在細胞上通過炎癥因子為檢測指標，證明藥物的有效性。
PNAS的文章。很有借鑒意義。
細胞模型：HFLS-RA。檢測指標：滑膜細胞增殖。
研究的藥物是煙曲霉素來源的化合物PPI-2458。
這個算是IC50測定。黑色圓圈的是HFLS-RA細胞，白色圓圈的是HUVEC，藥物都可以抑制其增殖。黑色方塊的是NHDF-Ad皮膚成纖維細胞，藥物對其沒有作用。
1、在類風濕關節炎研究中，細胞模型可以用MH7A和HFLS-RA。MH7A可以看作為正常細胞，疾病細胞模型需要用外加因子刺激。HFLS-RA本身來源于疾病，為疾病細胞模型，可以直接用。
2、檢測指標，可以用炎癥因子作為分子marker指標。也可以用增殖作為指標。
3、增殖作為指標，進行高通量藥物或者功能基因篩選，是常規方案。如果以分子marker作為指標進行高通量藥物或功能基因篩選，可以把該分子的promotor后接GFP或LUC，以GFP或LUC的改變作為檢測指標，參考第一篇文章。
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