A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒-上海轉(zhuǎn)染生物ZetaLife
A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒，合計1.3萬bp左右，使用上海轉(zhuǎn)染生物的ZetaLife Advanced轉(zhuǎn)染試劑。
 
一、轉(zhuǎn)染步驟：
1、質(zhì)粒提取：使用無內(nèi)毒素提取試劑盒
2、質(zhì)粒溶解：溶于超純水或雙蒸水，一定不能溶于試劑盒Buffer等其他試劑
3、質(zhì)粒熒光：若質(zhì)粒不帶熒光、請使用熒光對照，方便查看轉(zhuǎn)染效率
4、質(zhì)粒濃度：500-600ng/ul
5、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物制備：質(zhì)粒8ug和轉(zhuǎn)染試劑8ul，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無需也不能另外加入任何試劑稀釋
6、細(xì)胞轉(zhuǎn)染前狀態(tài)：拍照片留存
7、貼壁細(xì)胞鋪板：6孔板完全培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗，細(xì)胞密度：60%左右（不同細(xì)胞，按48小時生長到90%，往前推算細(xì)胞鋪板密度）
8、轉(zhuǎn)染：將復(fù)合物加入輕搖混勻、培養(yǎng)箱培養(yǎng)
9、換液：轉(zhuǎn)染24小時后培養(yǎng)基換液
10、轉(zhuǎn)染效率：轉(zhuǎn)染48小時后拍熒光照片，查看轉(zhuǎn)染效率
11、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀態(tài)：拍明場細(xì)胞狀態(tài)照片
12、檢測：總計轉(zhuǎn)染48小時后提取RNA或蛋白檢測
 
二、介紹
上海轉(zhuǎn)染生物科技有限公司是服務(wù)于高校和科研院所生命科學(xué)研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、生物制品生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療等領(lǐng)域高科技生物技術(shù)企業(yè)。提供的第三代高分子、細(xì)胞內(nèi)可代謝的轉(zhuǎn)染試劑，解決了難轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染毒性大致細(xì)胞死亡多、需要無血清環(huán)境的這些問題，比如：RAW264.7、THP-1、精原干細(xì)胞、IPS細(xì)胞、BMDM、MT-4人淋巴T細(xì)胞、SW480、A549、U87細(xì)胞等；提供的活體動物可代謝體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑，可轉(zhuǎn)染長片段質(zhì)粒DNA至體內(nèi) 可通過靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的簡單方式完成轉(zhuǎn)染過程; 提供的無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴增和生產(chǎn)，培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物制品生產(chǎn)公司提供無血清的細(xì)胞規(guī)模生產(chǎn)支持；提供以植物生物為平臺基因序列100％人源化、細(xì)胞培養(yǎng)可分解的3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品等。
       美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細(xì)胞、活體動物轉(zhuǎn)染的第三代高分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的全球蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。
      美國Biozellen（比麗）團隊提供3D細(xì)胞/類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠產(chǎn)品：Biozellen 3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝、Biozellen 3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝，此產(chǎn)品為植物源、100%人源化氨基酸序列基質(zhì)膠、培養(yǎng)終止后基質(zhì)膠可以被溫和溶解并維持3D細(xì)胞/類器官完整性的三維結(jié)構(gòu)。產(chǎn)品性能穩(wěn)定可4度保存2年。Biozellen鼠尾膠原蛋白Ⅰ型產(chǎn)品內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL，純度≧95%，本產(chǎn)品用于在組織培養(yǎng)板上包被薄層涂層，以促進附著依賴于固定物的細(xì)胞附著；本品能用于制作3-D凝膠； Biozellen鼠尾膠原蛋白Ⅰ型產(chǎn)品可作為細(xì)胞培養(yǎng)的附著基質(zhì)，與成肌細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié)、肝細(xì)胞、胚胎肺、心臟外植體、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、胰島細(xì)胞一起在I型膠原的膜或凝膠上成功培養(yǎng)；Biozellen鼠尾膠原蛋白Ⅰ型產(chǎn)品也可用于特發(fā)性肺纖維化(IPF)的研究，研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激IPF對肺成纖維細(xì)胞的影響。 酸性溶液中的膠原蛋白可以產(chǎn)生三維支架，用于生物工程和細(xì)胞培養(yǎng)。本產(chǎn)品含有特殊的0.01N鹽酸可4度保存2年。美國Biozellen（比麗）團隊也可提供生命科學(xué)基礎(chǔ)研究與轉(zhuǎn)化研究的主要領(lǐng)域抗體產(chǎn)品包括：腫瘤、炎癥、內(nèi)分泌、干細(xì)胞等，我們承諾為客戶提供可靠的試劑并推動生命科學(xué)研究。
 
 

上海轉(zhuǎn)染生物科技有限公司于2022年02月16日成立。法定代表人徐雷，公司經(jīng)營范圍包括：一般項目：技術(shù)服務(wù)、技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)交流、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)推廣；專用化學(xué)產(chǎn)品銷售（不含危險化學(xué)品）；化工產(chǎn)品銷售（不含許可類化工產(chǎn)品）；實驗分析儀器銷售；儀器儀表銷售；制藥專用設(shè)備銷售；細(xì)胞技術(shù)研發(fā)和應(yīng)用；辦公用品銷售；勞動保護用品銷售；電子產(chǎn)品銷售；塑料制品銷售；儀器儀表修理（除依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目外，憑營業(yè)執(zhí)照依法自主開展經(jīng)營活動）等。