使用第三代轉染試劑,美國ZetaLife Advanced HCT116 (人結腸癌細胞) 高效率轉染shRNA,相當于9000bp左右質粒DNA
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HCT116 (人結腸癌細胞) 高效率轉染shRNA--
HCT116 (人結腸癌細胞) 高效率轉染shRNA,相當于9000bp左右質粒DNA
使用第三代轉染試劑,美國ZetaLife Advanced Transfection reagent
一、HCT116 (人結腸癌細胞)shRNA轉染步驟:
1、合成shRNA時請帶熒光,若shRNA不帶熒光、請使用熒光對照,方便查看轉染效率
2、shRNA濃度:20uM/L
3、shRNA和轉染試劑復合物制備:shRNA取8ul和轉染試劑取8ul,吹打混勻室溫靜置15分鐘,無需另外加入任何試劑稀釋
4、細胞轉染前狀態:拍10和20倍鏡細胞明場照片留存
5、貼壁細胞鋪板:6孔板完全培養基2ml、培養基中不加雙抗,細胞密度:60%左右
6、轉染:將復合物加入后輕搖混勻、放入培養箱培養
7、換液:合計轉染24小時后培養基換液
8、轉染效率:總計轉染48小時后拍熒光照片,查看轉染效率
9、轉染后細胞狀態:拍10和20倍鏡細胞明場照片留存
10、檢測:轉染48小時后提取RNA或蛋白檢測
二、公司介紹
上海轉染生物科技有限公司是服務于高校和科研院所生命科學基礎研究、生物醫藥研發、細胞生物學產業化等相關領域的高科技生物技術企業。我們服務于生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物制品生產、基因和細胞治療領域等客戶。提供的第三代細胞內可代謝的ZetaLife AdvancedDNA\RNA轉染試劑,解決了部分細胞轉染效率低、脂質體轉染毒性大、需要無血清環境的這些問題;提供的in vivo Advanced活體動物體內轉染試劑可以通過靜脈注射或體內局部組織注射的方式完成轉染過程; 提供的inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清D 細胞培養規模生產支持;提供以植物生物為平臺基因序列全部人源化、細胞培養可分解的3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品等。
美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區聯合開發用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術之一。