一、服務介紹

  大量的研究表明線粒體與細胞凋亡密切相關，其中線粒體跨膜電位（MMP）的下降，被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件之一。它發生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA斷裂）出現之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰，則細胞凋亡不可逆轉。

二、實驗原理

 JC-1是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料，可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在，分別處于不同的熒光發射峰。當JC-1 濃度低或膜電位水平低時，主要以單體形式存在，激發波長為527nm，呈綠色熒光；當JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時，形成聚合物，發出紅色的熒光，激發波長為590nm。當細胞發生凋亡時，線粒體跨膜電位被去極化，JC-1從線粒體內釋放，紅光強度減弱，以單體的形式存在于胞質內發綠色熒光，根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。

三、實驗流程

1. 細胞培養；

2. 用適當的方法誘導細胞凋亡，同時設立陰性依照組合陽性對照組，收集細胞；

3. 用PBS洗滌細胞三次，收集不多于1×106的細胞；

4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL滅菌去離子水稀釋成1×Incubation Buffer，混勻并預熱至37℃；

5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，渦旋混勻配成JC-1工作液；

6. 取500 μL JC-1工作液將細胞均勻懸浮，37℃，5% CO2的培養箱中孵育15~20min。

7. 室溫離心（2000rpm,5min）收集細胞，用1×Incubation Buffer洗兩次；

8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細胞；

9. 流式細胞儀檢測，分析。

四、客戶提供

細胞株(凍存株或培養好的細胞)，相關藥品或MMP檢測試劑盒（可代購）

五、公司提供

實驗步驟、結果圖、數據結果和分析報告

實驗周期：1-2周，具體需要根據細胞生長情況及實驗內容而定。

基爾頓生物科技（上海）有限公司成立于2005年，于2012年更名為基爾頓生物科技（上海）有限公司，公司位于上海長江軟件園，實驗室面積600多平方米。公司目前具備全方位的生物學、醫學技術服務平臺，能夠為廣大客戶提供醫學科研樣本檢測、合作研究、開發及生產服務。

  我們擁有專業的實驗室、先進的實驗設備和經驗豐富的科研技術人員。技術團隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣。通過高度細分、全方位的服務平臺，為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務。目前，協助發表的SCI及國家核心期刊上的學術論文達兩千余篇，涉及臨床醫學、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學、分子生物學等生命科學、醫學等諸多領域。

  更為可喜的是，公司于2015年投資建立了1800平方米的動物中心，能夠為廣大客戶提供更為專業的實驗動物飼養及造模服務。

時光荏苒，通過全體員工的共同努力，公司完全具備從上游的高通量篩選到下游特定基因功能解析的完善整合技術平臺，能夠真正為客戶提供專業、完善的技術解決方案和服務。

  我們終極目標是為了使您的工作更輕松、更快捷，不斷更新實驗方法和引進新的產品為您提供一站式服務，控制和降低各種成本，為您的研究加油。