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常州百代生物使用SYBR Green法或者Taqman 法對 DNA/RNA 進行定量測定或型的鑒定。
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熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)
熒光定量PCR 實時熒光定量PCR技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,已成為國際公認的核酸分子定量的標準方法,目前在基因表達研究和臨床疾病檢測等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用,常州百代生物使用SYBR Green法或者Taqman 法對 DNA/RNA 進行定量測定或型的鑒定。
SYBR Green熒光染料法:適用于任何DNA,無需設(shè)計探針,采取雙標準曲線法,實驗周期短,結(jié)果重復性好,靈敏度高。
TaqMan熒光探針法:經(jīng)驗豐富的實驗技術(shù)人員設(shè)計探針,對目標基因有高特異性,實驗重復性好,相對于SYBR Green法,靈敏度更高。
服務(wù)流程
1、根據(jù)基因序列設(shè)計特異性的引物或熒光探針
2、提取樣品 DNA/ RNA、電泳、反轉(zhuǎn)錄
3、熒光定量PCR,進行擴增曲線、溶解曲線、表達量差異分析等實驗
4、實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料
熒光定量PCR服務(wù)要求:
1. 請您提供新鮮的且盡量多的材料(各種材料的RNA提取量請參照“總 RNA 的提取”),或直接提供純化好的總RNA(大于5 ug/樣品);(各種材料的DNA提取量請參照“DNA的提取”),或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品) 。
2. 請通過E-mail提供已知的全長基因序列。
3. 請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA來源 、豐度等
樣品類型 |
細胞 |
組織 |
全血 |
血漿 |
RNA |
DNA |
樣品最少量 |
106 |
100mg |
500ul |
500ul |
5ug |
5ug |
推薦保護劑 |
Trizol |
Trizol |
肝素 |
檸檬酸 |
Rnase-Free水 |
無 |
運輸條件 |
液氮/干冰 |
干冰 |
干冰 |
干冰 |
干冰 |
冰袋 |
熒光定量PCR操作程序:
1. 根據(jù)基因序列設(shè)計特異性的引物和熒光探針。
2. 提取DNA/RNA 。
3. Real Time PCR(熒光定量PCR),進行實驗結(jié)果分析
4. 實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料
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