我們針對一些關鍵基因,通過對其的狀態分析,構建了一系列工具細胞株,提供給基礎與研發工作者。
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HCS工程細胞株簡介 |
簡介 一些特定的信號通路基因,如MK2,SMAD2,NF-KB等,由于其強大的生物學功能,在藥物篩選和基礎科研中,發揮了極大的作用。通過構建出其工具細胞株,我們可以快速,簡潔的將其應用到特定靶點的藥物篩選,特定信號通路的機制研究中,大大加速研究進程,并且獲得高質量的數據結果。基于此,我們針對一些關鍵基因,通過對其的狀態分析,構建了一系列工具細胞株,提供給基礎與研發工作者。 原理 挑選特定的功能基因,將其構建為外源融合蛋白,使其和GFP蛋白融合,然后在工具細胞內,穩定的表達。挑選的基因編碼的蛋白,是激活后分布狀態有變化的基因。在特定的藥物刺激,或者別的蛋白作用下,該融合蛋白在細胞內的位置會發生改變,我們通過采集圖像,分析蛋白的表達和分布,來確定那些藥物或者基因能激活或者抑制該信號通路。
MK2蛋白和EGFP融合,在IL-1或者TNFa的刺激下,該蛋白會從細胞核排出進入細胞質,而在IL-1或者TNFa抑制劑的作用下,重新入核。 應用 1,特異靶點藥物篩選與研究2,信號通路研究 現有產品 1. 細胞名:MK2 細胞類型:U2OS外源蛋白: human MAPKAPK2 (MK2) isoform 2 (GenBank Acc.NM_032960) fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP). 啟動子:CMV 抗性:geneticin 應用:TNFα, IL-6, and IL-1介導的免疫應激 2. 細胞名:smad2 細胞類型:MDA-MB-468外源蛋白: human Smad2 (GenBank Acc. NM_005901)fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP). 啟動子:CMV 抗性:geneticin 應用: TGFβ相關的細胞生長,分化和調亡 3. 細胞名:CB1 細胞類型:U2OS外源蛋白: human Cannabinoid receptor 1 (CB1) (GenBank Acc.NM_016083) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP). 啟動子:CMV 抗性:geneticin 應用: GPCR信號通路 4.細胞名:RAC1 細胞類型:CHO外源蛋白: human Pak1(67-166)-EGFP (Pak1RBD-EGFP)(GenBank Acc. NM_002576) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein(EGFP) and Ha-tagged human Rac1 (GenBank Acc. NM_006908). 啟動子:CMV 抗性:geneticin & zeocin 應用:RAS信號,細胞運動,細胞周期,細胞骨架組裝 5. 細胞名:M2.PKA 細胞類型:CHO_K1外源蛋白: muscarinic acetylcholine receptor 2 (M2)(GenBank Acc. NM_001006630) and the catalytic domain of human Protein Kinase A (PKAcat)(GenBank Acc. NM_002730) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein(EGFP). 啟動子:CMV 抗性:geneticin & zeocin 應用: GPCR信號通路 6. 細胞名:M3.NFATc1 細胞類型:U2OS外源蛋白: human muscarinic acetylcholine receptor 3 (M3)(GenBank Acc. NM_000740) and human NFATc1 (GenBank Acc. NM_172389) fused to the C-terminusof enhanced green fluorescent protein (EGFP).. 啟動子:CMV 抗性:geneticin & zeocin 應用: GPCR信號通路 7. 細胞名:AKT1 細胞類型:CHO_hIR外源蛋白: human Akt1 (GenBank GeneID: 207) fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP). 啟動子:CMV 抗性:geneticin 應用: 生長因子,趨化因子的下游信號通路 8.細胞名:M1.NFATc1 細胞類型:U2OS外源蛋白: human muscarinic acetylcholine receptor 1 (M1)(GenBank Acc. NM_000738) and human NFATc1 (GenBank Acc. NM_172389) fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP). 啟動子:CMV 抗性:geneticin & zeocin 應用: GPCR信號通路 9. 細胞名:NFKB 細胞類型:U2OS |