細(xì)胞轉(zhuǎn)移

服務(wù)流程

服務(wù)說(shuō)明

 
細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性的研究，尤其是在腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移中應(yīng)用很廣泛。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤生物學(xué)特征之一，在腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中的某些階段，腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)能力，如腫瘤細(xì)胞從原發(fā)瘤灶分離，進(jìn)而侵入到鄰近組織及再穿過(guò)血管壁進(jìn)入血液循環(huán)和穿出血管壁進(jìn)入繼發(fā)部位等，因而細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性的研究在弄清腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制上有重要位置。 
 

腫瘤運(yùn)動(dòng)性的研究方法主要是體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞主動(dòng)移行的能力，一般有劃痕實(shí)驗(yàn)、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移（transwell）實(shí)驗(yàn)等。 

 

細(xì)胞劃痕

是測(cè)定了腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)特性的方法之一，借鑒體外細(xì)胞致傷愈合實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停�在體外培養(yǎng)的單層細(xì)胞上，劃痕致傷，然后通過(guò)藥物或者干擾手段觀察腫瘤細(xì)胞遷移的能力。  
 

吉?jiǎng)P實(shí)驗(yàn)實(shí)例： 
針對(duì)目的基因的shRNA靶點(diǎn)病毒或?qū)φ詹《靖腥綡epG2細(xì)胞，四天后，在96孔板中鋪細(xì)胞50000細(xì)胞，次日待細(xì)胞貼壁后用槍頭均勻劃傷，用PBS洗盡劃痕時(shí)殘余細(xì)胞，以無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，檢測(cè)細(xì)胞不同時(shí)間的劃痕愈合情況，從而篩選出運(yùn)動(dòng)細(xì)胞發(fā)生變化的實(shí)驗(yàn)組。
  
對(duì)照組：感染陰性對(duì)照慢病毒細(xì)胞；
處理組：感染針對(duì)目的基因的shRNA慢病毒細(xì)胞
結(jié)論：降低目的基因的表達(dá)后，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力減弱。 
 

誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移 
將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱(chēng)上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱(chēng)下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)等的影響。常用普通transwell小室（遷移實(shí)驗(yàn)）和鋪有基質(zhì)的transwell小室（侵襲實(shí)驗(yàn)）兩種方式。
遷移實(shí)驗(yàn)通常選擇帶有8.0µm微孔的聚碳酸酯膜小室，上室鋪細(xì)胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，細(xì)胞會(huì)向營(yíng)養(yǎng)成分高的下室跑，定量進(jìn)入下室的細(xì)胞可反映細(xì)胞的遷移能力。侵襲實(shí)驗(yàn)與遷移實(shí)驗(yàn)不同的是，在聚碳酸酯膜上室側(cè)鋪上一層基質(zhì)膠，用以模仿體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)，細(xì)胞欲進(jìn)入下室，先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）將基質(zhì)膠降解，方可通過(guò)，定量進(jìn)入下室的細(xì)胞可反映腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。 
 

吉?jiǎng)P應(yīng)用實(shí)例： 
1、遷移實(shí)驗(yàn)： 
 
 

不同的方式處理乳腺癌細(xì)胞MCF7后，細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力發(fā)生改變。
 

2 、侵襲實(shí)驗(yàn)  
 
對(duì)照組：感染陰性對(duì)照慢病毒細(xì)胞；處理組：感染目的基因shRNA靶點(diǎn)慢病毒細(xì)胞
結(jié)論：RNA干擾后細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力減弱。
 

上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司 
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吉?jiǎng)P基因成立于2002年，是一家以轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)為核心模型的創(chuàng)新診療產(chǎn)品開(kāi)發(fā)公司。

在國(guó)外，轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)是創(chuàng)新藥物形成的成熟模式，但在中國(guó)仍處于起步階段。致力于與研究型醫(yī)生共同解決中國(guó)特有、高發(fā)疾病的新藥研發(fā)難題，開(kāi)發(fā)屬于中國(guó)人自己的創(chuàng)新藥物，吉?jiǎng)P基因積極接軌國(guó)際成熟的創(chuàng)新藥物形成模式，潛心深耕17年，目前已建成從基礎(chǔ)研究到臨床前研究再到臨床研究的完整研究開(kāi)發(fā)體系，形成獨(dú)一無(wú)二的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)系統(tǒng)。

吉?jiǎng)P基因總部位于上海張江，目前在職員工超過(guò)500人，其中50%以上具有碩士學(xué)位，10%以上具有博士學(xué)位；擁有涵蓋組學(xué)研究平臺(tái)、載體制備平臺(tái)、細(xì)胞與動(dòng)物模型構(gòu)建平臺(tái)在內(nèi)的全面基礎(chǔ)科研平臺(tái)以及1500m²的標(biāo)準(zhǔn)化GMP車(chē)間，可針對(duì)不同醫(yī)生的臨床科研需求展開(kāi)合作，并協(xié)助研究型醫(yī)生高效、高質(zhì)的形成研究成果，目前已累計(jì)參與10000多篇SCI文章的基礎(chǔ)科研工作，并申請(qǐng)專(zhuān)利121項(xiàng)，其中獲得授權(quán)62項(xiàng)；PCT專(zhuān)利申請(qǐng)5項(xiàng)，其中獲得美國(guó)授權(quán)2項(xiàng)。

基于工程化、系統(tǒng)化、產(chǎn)業(yè)化的專(zhuān)家系統(tǒng)及技術(shù)平臺(tái)，吉?jiǎng)P基因與全國(guó)超過(guò)90%的研究型醫(yī)院建立了良好的信任合作關(guān)系，累計(jì)助力研究型醫(yī)生超過(guò)30%，在合作中不斷加深對(duì)疾病機(jī)制的深刻理解，并發(fā)現(xiàn)數(shù)百個(gè)在中國(guó)特有、高發(fā)腫瘤中發(fā)揮關(guān)鍵作用的候選靶標(biāo)基因，建成吉?jiǎng)P獨(dú)特的疾病關(guān)鍵基因數(shù)據(jù)庫(kù)，形成吉?jiǎng)P基因豐富的臨床資源。

臨床資源是吉?jiǎng)P基因新藥開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)，吉?jiǎng)P基因在中國(guó)開(kāi)創(chuàng)性地應(yīng)用從疾病標(biāo)志物及靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)、靶點(diǎn)驗(yàn)證到藥物開(kāi)發(fā)，最終到臨床試驗(yàn)的全鏈條新藥開(kāi)發(fā)流程，與研究型醫(yī)生共同進(jìn)行基因治療、細(xì)胞治療以及抗體藥物新靶標(biāo)的研究，并挖掘具有開(kāi)發(fā)轉(zhuǎn)化前景的項(xiàng)目，利用自身所具備的新藥開(kāi)發(fā)能力，進(jìn)行新藥研發(fā)以及后期的成果轉(zhuǎn)化。其中，CD19-CART在頂尖三甲醫(yī)院進(jìn)行的超過(guò)30例臨床試驗(yàn)中獲得極好的安全性及療效，目前該項(xiàng)目已進(jìn)入IND申報(bào)階段，同時(shí)多個(gè)血液瘤和實(shí)體瘤項(xiàng)目也與臨床醫(yī)生共同推進(jìn)至臨床研究階段。

 “致力轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)，共創(chuàng)健康明天”，吉?jiǎng)P基因?qū)⒔��?ldquo;以終為始”的基因診療品種創(chuàng)新創(chuàng)制平臺(tái)，開(kāi)發(fā)中國(guó)高發(fā)、少藥和難診疾病的先進(jìn)診療產(chǎn)品，讓患者因?yàn)榧獎(jiǎng)P的努力獲得更高的五年生存率！

合作成果

作為基因功能研究的專(zhuān)業(yè)技術(shù)服務(wù)公司，吉?jiǎng)P基因?yàn)橹袊?guó)生命科學(xué)領(lǐng)域的科學(xué)家和醫(yī)藥企業(yè)提供了誠(chéng)信和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。中國(guó)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域科學(xué)家發(fā)表的國(guó)際高質(zhì)量科學(xué)論文中，截止2015年12月底，已經(jīng)有近3000篇使用了吉?jiǎng)P基因的產(chǎn)品和服務(wù)，包括發(fā)表在Cell（影響因子33.116）,Nature（影響因子42.351）, Nature Neuroscience（影響因子14.976）, Neuron（影響因子15.982）等雜志上的文章。應(yīng)用案例中，詳細(xì)列出了這些文章。

技術(shù)及研究資源

Affymetrix全基因組表達(dá)譜和miRNA芯片平臺(tái)；

高效shRNA文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)平臺(tái)；

cDNA文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)平臺(tái)；

慢病毒、腺病毒、腺相關(guān)病毒的構(gòu)建、包裝和純化技術(shù)平臺(tái)；

基因作用靶點(diǎn)快速篩選技術(shù)平臺(tái)；

藥物作用靶點(diǎn)快速篩選技術(shù)平臺(tái)；

穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株構(gòu)建技術(shù)平臺(tái)；

轉(zhuǎn)基因小鼠平臺(tái)。

市場(chǎng)覆蓋

經(jīng)過(guò)多年的努力，公司和遍及全國(guó)各地的、近300家3級(jí)甲等醫(yī)院的臨床科研工作者建立了穩(wěn)固、持續(xù)的合作關(guān)系。