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Real time PCR芯片技術服務
廣州諾特生物采用Qiagen公司RT2 Profiler qPCR Array System,可在一次實驗中準確定量檢測某條信號通路或者與某種疾病相關的上百個基因的mRNA水平。
服務類別:芯片與生物信息學總訪問:508
最后更新:2014-10-31半年訪問:24
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該技術克服了實時定量PCR檢測基因表達工作量大、耗時久的缺點,將基因芯片的檢測精度提高到了與實時定量PCR相當?shù)乃健? qPCR Array技術服務主要實驗步驟如下: 1 客戶樣品RNA抽提 a) 若實驗對象為組織樣品,取適量(50-100mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml的RNA抽提試劑Trizol,勻漿后抽提RNA。 b) 若實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,完全吸去培養(yǎng)液后加1ml的RNA抽提試劑Trizol,裂解后抽提RNA。 2 RNA質量檢測 a) 紫外吸收測定法測定RNA在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,以計算其濃度并評估RNA純度。 b) 使用甲醛電泳試劑進行變性瓊脂糖凝膠電泳,檢測RNA純度及完整性。 3 cDNA模板制備 按照逆轉錄酶使用說明將樣品RNA逆轉錄為cDNA。 4 實時定量PCR 根據(jù)說明將cDNA模板適當稀釋后加入到實時定量PCR反應混合液中,然后在含有基因特異性引物的96孔板各孔中加入等量反應液,進行實時定量PCR反應。 5 數(shù)據(jù)處理:利用儀器配套軟件計算各張PCR芯片中的每個基因的Ct值。最后,采用△△Ct方法比較相應基因的表達量變化。 提供實驗報告 :包括詳細的實驗方法及實時熒光定量PCR芯片實驗結果及相關圖表。 更多相關技術資料,歡迎來電咨詢!
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