
同位素標記相對和絕對定量(iTRAQ)概述
同位素標記相對和絕對定量(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation, iTRAQ)技術的發展得益于可進行多重標記的iTRAQ試劑的開發,該試劑結構由指示基團、中性平衡基團和反應基團三部分組成。不同指示基團及其相對應平衡基團的質量和都相同,而反應基團能與賴氨酸ε氨基和所有肽鏈的氨基末端連接,可標記所有氨基酸。不同標記試劑與來源于不同樣品胰酶消化后的肽段結合,經過色譜分離,并通過一級質譜和二級質譜。平衡基團在二級質譜時發生中性丟失,而報告基團在二級質譜低質量區域產生多個報告離子,其信號強度分別代表該標記樣品的表達量,根據報告離子的峰面積計算同一蛋白質同一肽段在不同樣品間的比值,從而實現蛋白的相對和絕對定量。
能夠得到:一般500至600種蛋白,以及不同樣品間蛋白質表達的差異。
應用:
£ 可同時標記2~8個樣品,一次實驗實現多達8個樣品的蛋白質鑒定和定量
£ iTRAQ技術不僅可發現胞漿蛋白,還有膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白。iTRAQ技術可檢測出低豐度蛋白、強堿性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白。
- 可以進行多個時間點蛋白質組動態變化的監測
- 可以分析詳細分期/型的臨床疾病樣本,并可設計樣本重復
- 甚至可以進行個體樣本的研究
- 細胞周期、細胞信號傳導整個過程的蛋白質組動態學
相比其他蛋白組分析:
蛋白質組分析技術 |
缺點 |
2D-PAGE |
對分子量多大或者過。>200000或者<8000)的蛋白質、低豐度蛋白質、極堿或者疏水蛋白質性難于分離。 |
DIGE |
對分子量多大或者過小(>200000或者<8000)的蛋白質、低豐度蛋白質、極堿或者疏水蛋白質性難于分離。 |
ICAT |
功能重要的不含半胱氨酸的蛋白質會被遺失;親和層析可能導致污染 |
技術特點和優勢:
- 定量敏感、反應速度快
- 標記完全,標記效率高達97%以上
- 較高的重復性,能簡化譜的復雜程度、提高離子強度
- 可對多達八種不同樣本同時進行定量分析
- 定性與定量同時進行
實驗大致流程:

生物信息分析

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蘇州帕諾米克生物醫藥科技有限公司(簡稱:諾米代謝)于 2013 年在蘇州工業園區成立,是中國最早成立、規模最大的代謝組學公司之一,致力于打造代謝組學精準醫學與營養全方案提供商,成為每個人的代謝管家。諾米代謝業務板塊包括組學技術服務、臨床質譜、組學臨床產品與生物大數據平臺,為全球客戶提供更快更精準的代謝組學技術服務、臨床產品及大數據服務。
諾米代謝由“國家千人”計劃人才、金雞湖科技領軍人才領銜,創始及核心團隊來自于哈佛大學、MD Anderson Cancer Center、UC Davis、加拿大 TMIC、北京大學、中科院等國內外知名高校科研院所,涵蓋代謝組學、生物信息學、生物大數據、質譜、藥學等領域的科學家團隊。諾米代謝在蘇州、南京、北京、南昌、成都、金華、東莞的實驗室共運行 80 余臺全型號進口質譜設備,覆蓋代謝組學、蛋白質組學檢測服務、臨床研發與檢驗等領域。
基于自身完整的樣品預處理平臺、高分辨率質譜平臺、海量代謝物庫與核心匹配算法、臨床大隊列樣本與組學大數據、獨家知識產權“全靶”技術平臺、及領先的云數據分析系統 BioDeep™ ,諾米代謝已為國內外 400 余家知名科研院所、400 余家三甲醫院以及食品與制藥企業提供全面、專業的代謝組學技術服務。服務項目囊括非靶向代謝組學、靶向代謝組學、全靶、脂質組學、蛋白組學、風味組學、空間及單細胞代謝組學,應用領域包括農業、環境、食品、營養、腫瘤、心血管疾病、代謝類疾病及腸道微生物相關的研究領域,覆蓋 100 余項細分檢測分析服務內容,為客戶提供個性化的代謝組學科研及臨床解決方案。
在質譜精準醫學及組學臨床方面,諾米代謝有多個創新產品研發管線,涵蓋心血管疾病、腦卒中、腫瘤與腸道微生物方向的診斷、輔助診斷、早篩及用藥指導應用。 基于自主國際領先的 MetaDiscovery™ 組學臨床技術平臺,諾米代謝在 2021 年啟動和實施了中國 10 萬人群前瞻性腦卒中大隊列代謝組學研究計劃,將持續轉化多個臨床診斷與早篩產品,著力于利用代謝組學技術降低中國腦卒中的發病率。 諾米代謝目前已獲得元生創投、薄荷天使及沃生投資等行業知名基金的多輪投資,并取得科技領 軍企業、CMA 認證企業、高新技術企業、江蘇省民營科技企業、ISO-9001 質量管理體系認證、 GLP 實驗室、第三方醫學檢驗所等資質,知識產權 30 余項,臨床注冊產品 20 余項。諾米代謝 將在精準醫學與精準營養領域持續發力,為健康中國 2030 做貢獻。