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DNA測序樣品要求
各類樣品模板均應提供相應的模板和引物信息,并清楚地填寫《生工生物測序訂單》。
服務類別:測序/合成總訪問:1393
最后更新:2013-3-24半年訪問:25
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模板 要求
未純化PCR產物 片段大于200 bp;
提供30 μl 以上的PCR擴增產物(總量1-2 μg);
取2-3 μl樣品,能夠清晰的檢測出目的條帶;
自帶引物。
已純化PCR產物 PCR產物溶于ddH2O中(請勿溶解在TE溶液中);
濃度大于30 ng/μl,體積大于10 μl,長片段需適當增加提供量;
電泳檢測條帶單一明亮;
自帶引物。

質粒
質粒溶于30-50 μl ddH2O中(請勿溶解在TE溶液中),電泳檢測濃度大于
50 ng/μl;
建議用相關試劑盒提取質粒;
如有可能,同時提供1 ml含有相應質粒的菌液備用;
需注明載體全稱和插入目的片段長度及測序要求。
菌樣
說明載體、抗性類型;我們提供氨芐青霉素,卡那霉素,四環素及氯霉
素四種抗生素;其余類型抗生素需自備并附使用說明;
應為高拷貝質粒,對于低拷貝質粒,請直接提供約1 μg純化質粒;
提供1 ml左右過夜培養(12 h)的菌液,加入終濃度為15%的滅菌甘油,
于EP管中封口保存,防止交叉污染或滲漏;
大量樣品測序,建議在一次性塑料培養皿固體培養基上穿刺培養;
建議盡量提供穿刺培養或斜面培養的菌種(裝在EP管中)。

自帶引物
濃度不低于5 pmol/μl(即5 μmol/L),體積20-50 μl,并請注明濃度;
隨機引物(RAPD引物)、簡并引物、長度不足15 bp或大于30 bp引物、
有特殊標記的引物或不純的引物均不能用于測序;

盡可能提供引物全序列、PCR退火溫度等信息,以供參考。


免費提供的通用引物
M13+[即M13(-47)], M13-[即M13(-48)], M13(-20), M13(-26), T7promoter,
T7 terminator, SP6, T3, BGH,
5'/3'AOX, α-factor, -96gⅢ, pBV220+/-, PT5, pEGFP-N5'/3', pEGFP-C5',3',
pCMV5-F/R, pQE30+/-, 5'/3'AD,
pGEX5'/3', pGL3+/-, Pact2F/R, 27F, 1492R, CMV, U6promoter, S-Tag等
通用引物。
如您需要的引物不在此列,請電話咨詢或自帶引物,如需生工合成,請注明。

 
溫馨提示:
1. 對于甘油菌、穿刺培養菌、以及抽干的質粒可以采用常溫運輸。
2. 對于溶解保存的質粒、PCR已純化和未純化產物建議冷藏運輸。
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