重組胰蛋白酶是一種通過基因工程技術生產的蛋白酶，其氨基酸序列與天然胰蛋白酶（如豬胰腺來源的胰蛋白酶）一致，但由大腸桿菌或畢赤酵母等宿主表達生產。它具有高效、非動物源和高純度的特點，避免了傳統動物源胰蛋白酶可能攜帶的外源病毒污染風險。

胰蛋白酶在蛋白質組學、生物制藥和細胞培養等領域中扮演著關鍵角色。

生產方法

* 表達系統： 常用的表達系統包括：

* 大腸桿菌 (E. coli)： 成本低，生長快，易于操作，但可能需要進行復性處理。

* 酵母 (Yeast)： 具有真核細胞的翻譯后修飾能力，更適合生產具有復雜結構的酶。

* 哺乳動物細胞 (Mammalian cells)： 能夠進行正確的翻譯后修飾，但成本較高，生產周期較長。

* 昆蟲細胞 (Insect cells)： 介于酵母和哺乳動物細胞之間，具有一定的翻譯后修飾能力，成本適中。

* 純化方法： 常用的純化方法包括：

* 親和層析 (Affinity chromatography)： 利用胰蛋白酶的特異性結合能力，例如使用抑肽酶（aprotinin）作為配基。

* 離子交換層析 (Ion exchange chromatography)： 根據胰蛋白酶的電荷性質進行分離。

* 分子篩層析 (Size exclusion chromatography)： 根據分子大小進行分離。

應用
（1）細胞培養
貼壁細胞消化：用于疫苗生產、干細胞培養和原代細胞獲取，能夠高效解離細胞且對細胞傷害較小。
微載體培養：在生物反應器中用于大規模細胞培養的細胞收獲。

（2）疫苗生產
病毒裂解：在流感疫苗生產中，重組胰蛋白酶用于裂解病毒血凝素（HA），促進病毒成熟。
生物安全：避免基因工程疫苗生產中外源基因逃逸的風險。

（3）蛋白質研究與藥物開發
蛋白質測序與肽譜分析：用于蛋白質組學研究，特異性切割賴氨酸和精氨酸殘基的肽鍵。
藥物生產：如胰島素生產中，用于前體蛋白的水解和激活。

（4）合成生物學與生物工程
基因編輯：作為分子工具，用于CRISPR-Cas9等基因編輯系統中DNA的切割。
人工代謝途徑構建：在生物合成路徑中作為催化劑，優化反應效率。

優勢與未來發展方向
優勢：
安全性高：無動物源病毒污染風險，適合生物制藥和細胞治療514。
效率高：比活力高，用量少，降低成本5。
穩定性好：在-25℃至-15℃下可穩定保存24個月5。

未來發展方向：
酶工程優化：通過合成生物學手段進一步提高其特異性和活性4。
應用擴展：在生物燃料、食品工業和環境監測等領域的潛在應用