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RNA恒溫快速擴增試劑盒膠體金試紙條型使用說明

瀏覽次數(shù):498 發(fā)布日期:2025-2-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負

【原理概述】

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術(shù):在常溫恒溫下,特殊修飾的反轉(zhuǎn)錄酶利用特異性引物和模板RNA合成cDNA鏈,反應(yīng)體系中的重組酶、單鏈 DNA 結(jié)合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA 鏈為模板進行快速核酸擴增反應(yīng)。依賴nfo 酶的作用,加入根據(jù)模板設(shè)計的特異的分子探針,使用膠體金技術(shù)(三明治夾心法)可以對最終結(jié)果進行檢測。

【產(chǎn)品特點】

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應(yīng)時間短(僅需 12 min)等優(yōu)點,反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡便,易于保存。本試劑對設(shè)備要求低,金屬浴、水浴鍋等即可進行反應(yīng)操作,無需購買 PCR 擴增儀等價格高昂的專屬設(shè)備。

【引物設(shè)計】

建議使用長度在 30-35 bp 的引物,引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度;下游引物的 5’端標記一個修飾基團(常用生物素)。引物設(shè)計避免形成二級結(jié)構(gòu)而影響擴增;擴增

子長度建議在 150-500 bp。

【熒光探針設(shè)計】

在上下游引物中間,設(shè)計一段長度為46-52nt與目的片段互補的序列;5’端修飾一個抗原標記(典型 FAM);在 5’端和 3’末端的中部位置標記一個 dSpacer(四氫呋喃,THF),作為 nfo 的識別位點;3’末端標記一個修飾基團,例如胺基、磷酸基團或 C3-Spacer 等。

【試劑盒組成】

 

組成

含量

A buffer

1.6 mL×1管

B buffer

150 μL×1管

試劑

48份

使用說明書

1份

注:考慮到核酸降解問題,RNA 系列產(chǎn)品不提供正對照模板和引物探針。

【試劑盒儲存】

1.運輸溫度:≤ 20 ºC的恒溫環(huán)境;

2.儲存條件:儲存溫度 ≤ -20 °C(± 5 °C)恒溫環(huán)境,避光保存,避免重壓、反復(fù)凍融;

3.產(chǎn)品有效期:14個月;

4.生產(chǎn)日期見外包裝。

【注意事項】

  1. 由于試劑盒靈敏度非常高,在進行反應(yīng)時請注意避免核酸污染,并設(shè)置空白對照;

  2. 使用時請取出實驗所需的 MIRA 反應(yīng)單元的數(shù)量,剩余部分請置于存儲條件下。

發(fā)布者:上海惠誠生物科技
聯(lián)系電話:18018625233
E-mail:17715331663@163.com

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