自動計測濾膜應用案例：計測生活飲用水樣本中大腸菌群總數量

瀏覽次數：969　發布日期：2024-10-31　來源：程淇生物

根據國家標準,生活飲用水中不應含有病原微生物；生活飲用水應對微生物的幾個指標總大腸菌群、大腸埃希氏菌、菌落總數。其中菌落總數不能超過100個ＣＦＵ／ｍＬ），總大腸菌群限值為不應檢出。本方案利用濾膜法過濾法，將濾膜放置在品紅亞硫酸鈉培養基培養后計數，達到檢測出生活飲用水中的總大腸菌群數量。
方案詳情：

實驗原理

先通過手動或自動培養皿分裝儀分裝好選擇性培養基，用孔徑為0.45μm的微孔濾膜過濾水樣后,將濾膜貼在選擇性培養基上培養后,能形成典型菌落，通過自動菌落計數儀計數總大腸菌群數量的方法。
二、實驗準備
1、培養基和試劑
① 品紅亞硫酸鈉培養基
② 乳糖蛋白胨培養液
2、儀器與設備
① 過濾設備：配備濾器和抽濾裝置
② 濾膜：孔徑0.45um
③ 無齒鑷子
④ 恒溫培養箱
⑤自動培養皿分裝儀 fluidot FDT-MF80
⑥自動菌落計數儀SHASHIN KAGAKU，PSF-1100。

三、實驗步驟
1、濾膜滅菌:將濾膜放大燒杯中,加人純水,置于沸水浴中煮滅菌3次,每次15min。前兩次煮沸后需更換純水洗滌2-3次,以除去殘留溶劑�；蚴褂梅弦蟮囊淮涡詿o菌濾膜。
2、濾器滅菌。用點燃的酒精棉球火焰滅菌。也可用高壓蒸收滅菌器121℃高壓蒸汽滅菌20 min。
3、用鑷子夾濾膜邊緣部分、將粗糙面向上，貼放在已滅菌的濾床上，固定好濾器，將100 ml水樣(如水樣含菌數較多，,可減少過濾水樣量，或將水樣稀釋）注入濾器中，打開濾器閥門，-5.07 x10'Pa（-0.5大氣壓）下抽濾。
4、過濾完水樣后，再抽氣約5S，關上濾器閥門，取下濾器，用鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在品紅亞硫酸鈉培養基上，濾膜截留細菌面向上，濾膜應與培養基完全貼緊，兩者間不應留有氣泡，然后將平皿倒置，放入36℃±1℃恒溫箱內培養24h±2h。