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最新量化評估方法之組織透明化技術在3D生物打印血管中的應用

瀏覽次數:917 發布日期:2024-6-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負



研究摘要

預血管化在可植入性3D打印組織的發展中備受關注。雖然各種預血管化技術已被開發以改善移植物血管化,但預血管化模式對體內新生血管形成的影響尚未被研究。在本研究中,開發了一種可顯著促進移植物血管化的功能性預血管化結構,并對各種打印設計的微血管模式(μvp)進行了體內評估。

通過內皮細胞和脂肪干細胞(ADSC)共打印誘導高密度毛細血管。將帶有各種μVP設計的打印結構植入小鼠股動靜脈束模型中,并通過組織透明化技術的三維可視化和新生血管的免疫組織化學分析評估移植物血管化。


研究亮點

  1. 將3D打印組織工程與組織透明化的結合,采用3D可視化結果對新生血管進行量化評估,證實了µVP對體內新生血管形成的模式效應。

  2. 預血管化模式對體內新生血管形成的影響。

  3. 提出的具有兩種協同模式(µVP和AMP)的預血管化構建體,并驗證了其對移植物血管化的有效性。
     


實驗設計

  1. 為了精確量化整個植入性3D打印組織構建體中的新生血管化,通過組織透明化和3D熒光成像對血管系統進行三維可視。使用Binaree Tissue Clearing™試劑盒(HRTC-001,Binaree,Daegu,Republic of Korea)對固定植入的樣本進行透明化處理。

  2. 在光片顯微鏡下觀察透明化的樣品。用561nm波長的激光掃描樣本,獲得樣本的3D高分辨率圖像結果。

  3. 通過Imaris程序函數量化新血管的總體積和分支血管直徑(來自股動脈血管束)。


研究結果
在以前的研究中只有3D打印組織對血管模式的影響被證明,而預血管化模式對體內新生血管形成的影響尚未闡明。

因此,在本研究中使用AV束模型(允許固定宿主血管的位置)分析了基于µVP設計的新血管形成結果。基于組織透明化的3D成像和免疫組化的定量,證實µVP遠端組比µVP近端組和組合組(兩組的組合設計)誘導更多的新生血管,從而產生最有效的結果。

 

發布者:普瑞麥迪(北京)實驗室技術有限公司
聯系電話:4006-813-863
E-mail:hzhang@premedlab.com

標簽: 組織透明化
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