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GLP-1類藥物及其純化工藝介紹

瀏覽次數:1837 發布日期:2024-4-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
GLP-1及其類似物

胰高血糖素樣肽(Glucagon-Like Peptide,GLP-1)是由腸道分泌的一種內源性肽類激素,促進胰島素分泌并抑制胰高血糖素的分泌。胰高血糖素樣肽-1受體激動劑(Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Agonist,GLP-1RA )是GLP-1經結構修飾所得的GLP-1類似物,提高體內活性GLP-1水平,降低血糖。

上游制備工藝

GLP-1類藥物是一種多肽類藥物,上游制備工藝主要分為化學合成法與生物發酵法。生物發酵法以大腸桿菌、酵母及CHO細胞表達為主,通常將多肽與標簽融合表達,安全性高、成本低、生產規模大,但該途徑獲得的多肽樣品成分復雜,對下游層析工藝提出更高的要求。

下游純化工藝

不同生物發酵法的下游層析工藝也不盡相同,主要體現在捕獲階段。

GLP-1RA 多肽

簡單的GLP-1RA 多肽純化可先采用陰離子交換層析粗純,去除氨基酸數目缺失雜質以及大量HCP、HCD后再經反相層析精純,去除異構體、降解肽與其他副產物。

Fc 融合蛋白 GLP-1RA 多肽

這類GLP-1RA 多肽具有部分抗體的性質,分子量大、易形成聚體,可采用Protein A或Protein G親和填料捕獲FC融合蛋白,再經離子與疏水進行進一步純化。

His 標簽融合蛋白 GLP-1RA 多肽

Ni柱可捕獲His 標簽融合蛋白,如需加入尿素、鹽酸胍或還原劑溶解包涵體時,推薦TED絡合的鎳金屬鰲合填料。后續再利用離子、疏水或反相填料精純,提高活性多肽純度。

HSA 融合蛋白 GLP-1RA 多肽

人血清白蛋白修飾后的GLP-1RA 多肽分子量增大,可延長半衰期,粗純階段使用藍膠(博格隆Blue Bestarose FF)對白蛋白融合蛋白進行捕獲。

總結

GLP-1類藥物的生物活性易受純度的影響,根據不同的開發策略,需要采用不同的純化路線,因此開發有效的純化方法對于提高產品質量至關重要。

發布者:博格隆(浙江)生物技術有限公司
聯系電話:400-820-5172
E-mail:info@bestchrom.com

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