膠原蛋白的提取方法主要分為兩類：動物源提取法和基因重組法。前者通過酸法、堿法或者酶法從動物皮膚、跟腱部位提取膠原蛋白。酸法將前處理（去脂、切片、粉碎）后的樣品酸解，獲得酸溶性膠原蛋白，優(yōu)點是蛋白三螺旋結構完整、成纖維性能好，成本較低但存在較高的免疫原性風險。酶法常使用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶地切割膠原蛋白的末端肽，主體溶于中性或酸性溶液中，最終被提取，該方法獲得的膠原純度高、理化性質(zhì)較好，常用于高附加值產(chǎn)品的開發(fā)。
 

基因重組法是將人膠原蛋白基因序列進行特定設計、酶切和拼接、連接載體后轉(zhuǎn)入工程細胞，通過發(fā)酵表達生產(chǎn)膠原蛋白。主要包括表達體系的構建、發(fā)酵以及純化3個過程。表達體系存在原核、真核、昆蟲病毒、哺乳動物等多個表達體系，但目前可進入工業(yè)化生產(chǎn)或已商品化的重組膠原蛋白主要采用基于大腸桿菌、酵母等微生物發(fā)酵的技術。
 

相比動物源提取法，重組法可加工性（如水溶性和乳化特性）較好，能降低免疫原性。
 

作為分離純化的第一步，細胞破碎是至關重要的一環(huán)。細胞破碎的過程能夠有效釋放細胞內(nèi)的目標物質(zhì)，以確保后續(xù)純化步驟的順利進行和最終產(chǎn)品的質(zhì)量。高壓均質(zhì)是最常用的機械裂解方法，具有良好的可放大性，且不需要添加額外的試劑。
 

ATS安拓思提供全系列的高壓均質(zhì)機產(chǎn)品，可支持從實驗室到生產(chǎn)的不同規(guī)模應用，最高處理流量可達4,000 L/H。

注射用膠原蛋白的制備工藝流程主要包括以下幾個關鍵步驟：

1、原料準備：首先，選擇優(yōu)質(zhì)的膠原蛋白作為主要原料，這可以是從動物源（如魚類、豬皮、牛皮等）提取的膠原蛋白，或者是通過生物技術手段生產(chǎn)的重組膠原蛋白。同時，準備好所需的輔料，如穩(wěn)定劑、緩沖劑、保濕劑等，這些輔料的選擇應符合藥品生產(chǎn)的相關規(guī)定。

2、溶液制備：按照一定比例將膠原蛋白與緩沖劑溶解，同時加入適量的穩(wěn)定劑和保濕劑。通過充分攪拌混合，確保溶液均勻。

3、pH調(diào)節(jié)：使用酸堿調(diào)節(jié)劑對溶液進行pH調(diào)節(jié)，使其達到適宜的酸堿度。這一步驟至關重要，因為它可以確保膠原蛋白的穩(wěn)定性和活性。

4、過濾：將制得的溶液通過特定孔徑的過濾器進行過濾，以去除雜質(zhì)和微生物。這一步驟對于保證產(chǎn)品的純凈度和無菌性至關重要。

5、均質(zhì)化處理：利用高壓均質(zhì)機對膠原蛋白溶液進行均質(zhì)化處理。通過高壓和剪切力，使膠原蛋白顆粒更加細膩均勻，提高產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

6、無菌灌裝：在無菌條件下，將處理好的膠原蛋白溶液灌裝到適合的容器中，如注射器或瓶中。

7、質(zhì)量控制與檢測：對制備好的注射用膠原蛋白進行嚴格的質(zhì)量控制與檢測。這包括理化性質(zhì)測試、微生物檢測、生物學活性測試等，以確保產(chǎn)品符合規(guī)定的標準。