芯片點樣儀在植物多糖組分研究中的應用

瀏覽次數：1404　發布日期：2022-12-21　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

ArrayJet芯片點樣儀推動植物多糖組分研究

蘆薈凝膠是一類全球流行的日化、醫用產品，可修復皮膚劃傷、淡化疤痕、消炎抗菌等，其功效源于蘆薈含有的天然生物活性多糖。據統計，25%的蘆薈屬植物應用于傳統醫學，表明蘆薈中的生物活性多糖成分可能在整個蘆薈屬中普遍存在。然而多糖的復雜性給開發蘆薈產品，以及建立相關的分析方法帶來了極大挑戰。近些年，糖芯片微陣列檢測可作為一種分析多糖成分的有效方法。本研究的目的，則是使用糖芯片微陣列對兩種藥用蘆薈和兩種非藥用蘆薈隨季節變化的多糖組成進行研究，從而對商業種植獲取不同種類蘆薈多糖優化的收獲時間提供建議。

該文章發表于Frontiers in Plant Science雜志，研究者對4種蘆薈屬植物進行多糖成分研究。植物生長在玻璃容器中，取樣時均已成熟，其生長條件模擬野外環境，包括日照變化和土壤水分含量等。如（表1）：

蘆薈樣本獲取于2017年6月26日至2018年6月25日，每月采集3次。為了降低酚類化合物污染的風險，作者僅收集了蘆薈內部的葉肉用于制備糖微陣列芯片，樣本取出后立即放置在帶有標簽的EP管中，并在液氮中快速進行低溫冷凍，冷凍后在-20℃下保存24小時，隨后干燥并稱重，用玻璃珠在組織裂解液中研磨，最后提取，操作步驟如圖1：

提取分三步進行，首先根據每個樣品的重量計算萃取劑體積，萃取比例10mg樣品加300μL萃取劑。使用溶劑如下：
1.dH2O提取可溶性或未結合以及松散結合的多糖，主要是甘露糖；
2.50mM CDTA主要提取果膠和半纖維素；
3.4mM NaOH主要提取半纖維素。

提取后，樣品以4000RPM離心10 min，然后取上清液，轉移到已標記的EP管中。每個樣品用Arrayjet緩沖液（55.2%甘油，44%水，0.8% Triton X-100）進行稀釋，隨后加入384孔板中，并以3000RPM離心10 min，使用英國ArrayJet公司的生物芯片點樣儀將樣品點印在硝化纖維素包被的玻片上。使用15個可以與果膠和半纖維素多糖結合的單克隆抗體作為一抗進行孵育，二抗選擇鼠來源的堿性磷酸酶與一抗進行結合。

統計結果如圖2：橫列為15種與不同多糖結合的一抗以及陰性對照，縱列為四種蘆薈植物在不同季節的分類，數值為二抗結合信號的平均值。

結果發現不同種屬的蘆薈屬植物在不同季節多糖表達有明顯的差異，而糖芯片檢測有可能作為一種直接靶向相關多糖存在和研究多糖組成的篩選方法。

原文鏈接：https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2019.00512/full

ArrayJet位于英國愛丁堡，專注于提供生物芯片應用領域的解決方案及服務。自2000年公司成立即致力于開發新型生物樣品噴點方案–噴墨式液體處理平臺，該系統于2006年上市，目前用戶遍布全球27個國家。

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