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甘露糖醛酸寡糖對H2O2誘導(dǎo)衰老心肌細胞的影響

瀏覽次數(shù):1334 發(fā)布日期:2021-6-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
甘露糖醛酸寡糖對H2O2誘導(dǎo)衰老心肌細胞的影響
 

甘露糖醛酸寡糖是褐藻寡糖的一種,由褐藻膠加工而成,具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等多種生物學活性,有重要的臨床應(yīng)用價值。本實驗采用H2O2誘導(dǎo)建立心肌細胞衰老模型,探討甘露糖醛酸寡糖對衰老心肌細胞的保護作用。
 

試驗設(shè)5組:對照組(A組),H2O2組(B組),H2O2+甘露糖醛酸寡糖(M3K)低劑量組(C組),H2O2組+甘露糖醛酸寡糖(M3K)中劑量組(D組),H2O2+甘露糖醛酸寡糖(M3K)高劑量組(E組)。當細胞融合度達50%時,B組、C組、D組和E組細胞分別加入100μmol/L的H2O2誘導(dǎo)建立衰老模型,4小時后更換新鮮DMEM完全培養(yǎng)液。H2O2組繼續(xù)培養(yǎng)48小時,甘露糖醛酸寡糖(M3K)干預(yù)各組分別加入10、50、100mg/L的甘露糖醛酸寡糖(M3K)培養(yǎng)48h。檢測各心肌細胞數(shù)量、各組心肌細胞P21和P53蛋白表達比較、各組細胞beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表達比較。結(jié)果,培養(yǎng)48小時后,B組(H2O2組)細胞數(shù)量與對照組相比明顯減少;甘露糖醛酸寡糖(M3K)干預(yù)各組細胞數(shù)量與H2O2組相比呈劑量依賴性增加,C組、D組、E組細胞數(shù)量分別比B組增加51.3%、82.2%、97.4%。與對照組相比,B組(H2O2組)心肌細胞P21和P53蛋白表達顯著增加;甘露糖醛酸寡糖(M3K)干預(yù)48小時后,各組心肌細胞P21和P53蛋白表達隨甘露糖醛酸寡糖(M3K)濃度的增加而降低,C組、D組、E組P21蛋白表達比分別比B組降低了20.0%、29.3%、40.3%;P53蛋白比分別比B組降低了30.2%、51.2%、62.2%。與對照組相比,H2O2組心肌細胞beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表達水平顯著降低;甘露糖醛酸寡糖(M3K)干預(yù)48小時后,各組心肌細胞beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表達呈濃度依賴性增加,C組、D組、E組beclin1表達分別比B組增加了35.9%、78.0%、132.6%;Atg7表達分別比B組增加了62.6%、96.4%、192.8%;LC3-ⅡmRNA表達分別比B組增加了18.7%、45.3%、90.4%。
 

試驗結(jié)果表明,H2O2誘導(dǎo)了心肌細胞內(nèi)氧化應(yīng)激,引起細胞衰老,衰老后表現(xiàn)為細胞周期阻滯,增殖減少。甘露糖醛酸寡糖(M3K)干預(yù)衰老細胞48小時可使P21和P53蛋白表達下調(diào),緩解衰老心肌細胞的細胞周期阻滯,增殖加快,進而延緩心肌細胞衰老。甘露糖醛酸寡糖(M3K)處理后,細胞中的自噬相關(guān)基因beclin1、Atg7和LC3-ⅡmRNA表達增加,表明甘露糖醛酸寡糖(M3K)延緩心肌細胞衰老可能與自噬激活有關(guān)。

發(fā)布者:上海惠誠生物科技
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