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大小鼠MCAO造模方法及如何提高成功率的方法介紹

瀏覽次數(shù):459 發(fā)布日期:2020-12-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
大鼠MCAO造模方法
 
(1) 麻醉成功后以仰臥位固定于手術(shù)臺,常規(guī)備皮、消毒。將小鼠門齒利用縫合線鉤住、固定,使得頸部被拉伸,方便接下來的手術(shù)操作。利用常規(guī)眼科剪或手術(shù)刀從頸部正中切開,從頸正中切口,利用鑷子鈍性分離頸部腺體組織、筋膜,暴露并分離頸總動脈( common carotid artery, CCA)、頸外動脈( external carotid artery, ECA)和頸內(nèi)動脈( internal carotid artery, ICA)。

 

瑞沃德呼吸&麻醉解決方案
 
(2)分離ICA及其顱外分支翼顎動脈,利用縫合線打活結(jié),結(jié)扎翼顎動脈,或者直接利用血管夾夾閉翼鄂動脈,避免線栓插入翼鄂動脈,保持CCA的唯一開放分支為ICA。
 
(3)分離ECA主干,并利用電凝筆閉塞ECA的分支,結(jié)扎遠(yuǎn)心端并將其間斷。在ECA殘端用眼科剪剪開一“V”型小口,剪口之前用微動脈夾夾閉CCA和ICA,避免剪口處出現(xiàn)出血。將預(yù)處理過帶硅膠頭的線栓小心地從ECA插入。

 
 
 
(4) 去除ICA的微動脈夾后,插入尼龍線栓直至大腦中動脈的起始處,線栓插入17-18mm(見下圖)。根據(jù)筆者的經(jīng)驗,線栓插入的長度應(yīng)根據(jù)動物體重,如260~280g大鼠,插入深度約17mm,280g以上的大鼠,插入深度約18mm,總之,以遇到輕微的阻力為準(zhǔn),此時線栓正好進入顱內(nèi)的大腦前動脈,阻塞大腦中動脈的開口。
 
MCAO線栓法模型操作主要步驟示意圖
 
(5) 若要恢復(fù)大腦中動脈的血流,只需把線栓拔出,使頭端退到頸外動脈,頸總動脈的血流就可以再灌注到大腦中動脈。

(6) 結(jié)扎消毒后逐層縫合皮下組織和皮膚,等動物麻醉蘇醒后放回籠中即可。
 
(7) 手術(shù)結(jié)束后應(yīng)用激光散斑血流成像儀監(jiān)測大腦皮層血流,當(dāng)看到大腦皮層血液血流降低70%~80%,說明模型制備成功。
 
  
 
小鼠MCAO造模方法

小鼠MCAO模型的制作與大鼠的基本相同,可不結(jié)扎翼顎動脈,而是在進線栓時調(diào)整角度小心避開。其他不同之處在于,線栓為5-0到8-0(除5-0外,通常都需要包裹硅膠),長度為15mm。根據(jù)動物體重的具體情況,線栓插入頸內(nèi)動脈(10±0.5)mm即可,保證線栓正好進入顱內(nèi)的大腦前動脈,阻塞大腦中動脈的開口。

如何提高MCAO造模成功率?
 
(1)挑選合適線栓,滿足一下幾點要求:

 
  • 線栓不可過硬。過硬線栓容易找手感,但是容易出現(xiàn)刺破蛛網(wǎng)膜下腔血管,導(dǎo)致顱內(nèi)出血。同時過硬線栓還會改變血管自然形態(tài),當(dāng)線栓插入血管以后,因為線栓過硬,血管肌張力無法使得線栓改變形態(tài),只能被線栓改變形態(tài),導(dǎo)致血管處于緊繃狀態(tài),對于再灌注操作不利。
  • 選擇硅膠頭盡可能接近圓柱形的線栓,這樣當(dāng)線栓進入MCA外后,能夠完全堵塞MCA,而不會出現(xiàn)縫隙,使得線栓可以立即阻塞MCA。
 
(2)采用散斑血流儀,實時觀測顱腦血流情況。這樣可以準(zhǔn)確判斷線栓是否阻塞MCA,一旦血流灌注量下降超過70%,即代表線栓阻塞MCA。
 
(3)MCAO線栓手術(shù)屬于顯微操作手術(shù),不可控因素較多,需要多練習(xí)。一般常規(guī)連續(xù)練習(xí)3個月左右,即可實現(xiàn)造模;如果采用血流儀輔助造模,時間可以縮短至1個月,手術(shù)過程中可以實時調(diào)整線栓位置。另外現(xiàn)在發(fā)文越來越需要漂亮數(shù)據(jù),瑞沃德的激光散斑血流儀RFLSI Ⅲ可提供高清漂亮血管血流分布圖。

 
瑞沃德激光散斑血流成像系統(tǒng)RFLSI Ⅲ
發(fā)布者:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司
聯(lián)系電話:400-966-9516
E-mail:rwd@rwdls.com

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