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豌豆胰蛋白酶抑制因子(STI)ELISA試劑盒說明書

瀏覽次數:1463 發布日期:2019-11-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
豌豆胰蛋白酶抑制因子(STI)ELISA試劑盒
適用于檢測人動植物組織勻漿、細胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關生物液體中濃度。
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

試劑盒規格及配置  
 
名稱 96孔配置 48孔配置
微孔酶標板 12孔×8條 12孔×4條
標準品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
樣本稀釋液 6mL 3mL
檢測抗體-HRP 10mL 5mL
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL
底物A 6mL 3mL
底物B 6mL 3mL
終止液 6mL 3mL
封板膜 2張 2張
說明書 1份 1份
自封袋 1個 1個

自備物品
①.酶標儀(450nm)
②.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
③.37℃恒溫箱
操作步驟
①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
②.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
④.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次   (也可用洗板機洗板)。
⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
⑦.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
 
發布者:上海一基實業有限公司一部
聯系電話:021-60548335
E-mail:2355265332@qq.com

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