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HybriMore助力雜交瘤細胞融合和單克隆化

瀏覽次數:2234 發布日期:2019-11-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
單克隆抗體自問世以來,以其特有的高度專一性迅速占領醫學的多個領域,在蛋白親和純化、醫學診斷、腫瘤導向治療以及放射性免疫成像技術方面發揮著重要的作用,因此單克隆抗體的制備技術之一——雜交瘤技術也越來越重要。
 
雜交瘤技術是指將骨髓瘤細胞和免疫淋巴細胞融合,形成能分泌高度純一單克隆抗體的雜交瘤細胞的技術。可以簡單的概括為三個步驟:(1)細胞的選擇和融合(2)應用選擇培養基(HAT)篩選雜交瘤細胞(3)有限稀釋雜交瘤細胞克隆化,最終獲得能大量分泌高度純一單克隆抗體的雜交瘤細胞
過程看似簡單,實則困難重重,費事費力費感情~辛辛苦苦的幾個月動物免疫可能付諸東流,好不容易檢測到的陽性克隆可能越來越弱,相信中槍的肯定不止這一些
  1. 細胞融合率不高
  2. 細胞融合后生長狀態很差,時不時地飄起來,還沒2周細胞已全軍覆沒
  3. 單株化實驗不理想,能獲得的細胞克隆數量少
  4. 陽性率低
……
如果你有遇到以上問題,不防試試這款產品——HybriMore雜交瘤促進生長劑,盡最大可能保住若干個月辛苦免疫的成果--來之不易的抗體分泌細胞
 
產品特點:
  • 增加雜交瘤細胞存活率
  • 提升單株化雜交瘤細胞成功率
  • 非動物性來源成分,雜交瘤細胞不會產生依賴性,使用過程可根據細胞狀態酌情減少用量
部分實驗數據

a. 增加單株化融合瘤細胞存活率
HbriMore雜交瘤促進生長劑可以大幅提升融合后雜交瘤數目,添加HbriMore培養雜交瘤細胞,平均一盤96孔可以實現1000-1500個NS-1融合細胞存活,相比一般培養液可以增加10倍以上細胞數目
b. 提高單株化成功率
使用HbriMore雜交瘤促進生長劑進行單株化,每一盤約有90-96個細胞存活,單株化成功率超過80%,而一般牛血清培養液或Feeder Layer存活率分別為10-40%和50-80%
c. 不會降低抗體生產量
HbriMore雜交瘤促進生長劑不會對其分泌抗體量產生影響且HbriMore為非動物性來源的純化學配方,不會對雜交瘤細胞產生負面影響

風險提醒:此款產品并非對所有客戶的實驗流程均適用,以上數據僅供參考,具體的用量和效果需實際使用過程仔細觀察和進行數據對比。目前使用效果明顯的客戶回購率很高。

最后給大家分享個小編的經歷
 
關于雜交瘤的以上問題小編讀書的時候全部中槍。00年代的實驗室流行克隆新基因,被老板分配了一個NCBI上同源家族文獻少于3篇的基因,在CRO服務不發達的年代,未在幾家抗體公司貨架上的基因,只能硬著頭皮自行制備抗體。小編志向滿滿地擼起袖子開始純化蛋白,免疫兔子和小鼠,關鍵的那幾天恨不得搬著行軍床上實驗樓天臺簡易動物房和動物們陪吃陪住,小鼠在某學霸師姐的幫助下成功融合并檢測到效價不錯的抗體分泌克隆若干個,無奈隨著一輪輪的單克隆化過程,陽性數目越來越少,抗體表達量越來越低,以至于后期擴增后不敢再進行一輪單克隆化而選擇凍存保種。好在兔子免疫效果也不錯,最后在某學霸師兄的幫助下成功獲取兔子全血和血清。可喜的是,在折騰半年之后多抗制備成功。可惱的是隨后的半年時間小編花了3個月驗證了合格的可以避開同源基因的的siRNA序列,又花了3個月在這批siRNA的協助下驗證了多抗的特異性和靈敏度。至于那批未再單克隆化的抗體分泌細胞,十幾年過去了,還靜靜地躺在液氮罐。。。。。。
小編想說,在CRO服務越來越普及和專業化的年代,能夠將非核心實驗部分外包出去的小伙伴們,你們真是太幸福了,是不是要多發一些文章,多做一些好藥出來。
 
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