​大鼠ELISA試劑盒操作說明 

每一次提醒你總能默默地記住，每一項任務你都會靜靜地完成，對自己及時反省讓你慢慢地進步，望你帶著這些好的品質去新的天地開拓，一定會有豐厚的收獲。小編為大家介紹 大鼠ELISA試劑盒操作說明 。
操作步驟：

 

1.   標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為24ng/L，16ng/L ，8ng/L，4ng/L， 2ng/L）。

 

2.   加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

 

3.   溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

 

4.   配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

 

5.   洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

 

6.   加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

 

7.   溫育：操作同3。

 

8.   洗滌：操作同5。

 

9.   顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

 

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

 

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。