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應用CTCBIOPSY®平臺分離CTC探討鼻咽癌患者循環腫瘤細胞與EB病毒激活狀態的關系

瀏覽次數:4619 發布日期:2017-5-12  來源:http://www.yzymedical.com/cpzx_detail.asp?id=343&class_id=416

醫生首次在鼻咽癌患者中發現循環腫瘤細胞與EB病毒激活狀態間的關系

導語:

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)被證實與越來越多的惡性腫瘤相關而受到人們的關注,目前鼻咽癌循環腫瘤細胞(Circulating tumor cell,CTC)的研究及其臨床意義并不明確,本文中研究人員使用CTCBIOPSY®平臺分離CTC,并結合下游生物學技術探討了鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者中CTC與EBV之間的關系。

背景介紹:
鼻咽癌是頭頸癌中最常見的惡性腫瘤,CTC作為一個在多數腫瘤中極有潛力的預后指標,目前在鼻咽癌中的研究卻非常少。EBV(Epstein-Barr virus)由Epstein和Barr于1964年首次成功建株,又稱人類皰疹病毒4型(Human herpesvirus 4,HHV-4),是多種惡性腫瘤(如鼻咽癌)的病因之一,它主要感染人類口咽部的上皮細胞和B淋巴細胞,EBV的激活是鼻咽癌進展中的一個常見事件。本研究使用濾膜分離的方法富集鼻咽癌患者外周血中的CTC,并探討了鼻咽癌患者中循環腫瘤細胞與EB病毒激活狀態間的關系。

研究內容:
本研究入組了33名未分化型非角化性NPC患者,在患者進行初始治療前采集5mL靜脈血,并使用CTCBIOPSY®平臺(芝友醫療)對血樣進行分離染色,然后采用細胞形態學原理在光學顯微鏡下對CTC進行鏡檢計數,3個以上聚集成團的CTC稱為CTM(Circulating tumor microemboli),隨后將濾膜上已染色的細胞脫色后進行免疫組織化學染色(Immunohistochemistry,IHC),IHC檢測的標志物為CK5/6及P63。EBV 的DNA載量和VCA-IgA(病毒衣殼抗原)、EA-IgA(早期抗原)水平是EBV激活的重要指標。研究人員隨后在濾膜上使用原位雜交方法檢測了CTC中的EBERs(EBV-encoded RNAs),EBER原位雜交是確定EBV與疾病關系的公認標準方法。在33例鼻咽癌患者中,22例(66.7%)檢測出CTC(平均值為2.06)(圖1);2例(6.1%)(T3N3M0)檢測出CTM,在所有TMN分期的NPC患者中均有CTC檢出,CTC檢出與TNM分期無顯著相關性。CTC的檢出和EBV的激活狀態相關。在全部NPC患者和未發生遠端轉移的NPC患者中,CTC陽性患者的EBV的VCA-IgA水平高于CTC陰性患者(全部NPC患者陽性vs.陰性:4.86 vs. 3.88,P=0.016;未發生遠端轉移的NPC患者陽性vs.陰性:4.95 vs. 3.76,P=0.009 ),CTC的檢出數量與EBV的VCA-IgA水平和DNA載量相關。

圖1 鼻咽癌患者中CTC檢出圖
圖2 鼻咽癌患者中CTM檢出圖
圖3 鼻咽癌CTC的IHC染色圖  
A) CK5/6染色  B) P63染色
圖4 鼻咽癌CTM的EBERs原位雜交圖

研究結論:
在不同TNM分期的NPC患者中,CTC和CTM均有較高的檢出率,且CTC檢出與EBV激活狀態有關,CTC檢出數量與患者的EBV激活狀態呈正相關。使用CTCBIOPSY®平臺,結合免疫組化、原位雜交等技術,可以對腫瘤患者外周血中的CTC進行更多的下游生物學研究分析。


本文系中山大學腫瘤防治中心課題組與芝友醫療合作的研究成果!
原始出處:
He C, Huang X, Su X, Tang T, Zhang X, Ma J, et al. The association between circulating tumor cells and Epstein-Barr virus activation in patients with nasopharyngeal carcinoma. Cancer biology & therapy. 2017:0.

發布者:武漢友芝友醫療科技股份有限公司
聯系電話:027-65330996
E-mail:zhaopin@yzymedical.com

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