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使用CytoFLEX流式細胞儀+熒光染料CFSE檢測細胞增殖

瀏覽次數:10761 發布日期:2016-1-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。其基本原理如下:CFSE能夠輕易穿透細胞膜,在活細胞內與胞內蛋白共價結合,水解后釋放出綠色熒光。在細胞分裂增殖過程中,它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據這一特性,它可被用于檢測細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。

材料與方法
1.試劑

2.樣品制備

數據分析
在FSC/SSC上圈出淋巴細胞,使用FSC-W/FSC-A排除黏連體,CFSE/CD19圖中圈出CD19陽性細胞,使用CFSE單參分別看淋巴細胞與CD19陽性(B細胞)的增殖情況。


結果
對照組:

實驗組:
 

結果顯示,經過CpG 刺激3 天后的CD19 陽性細胞增殖效率比對照組有明顯的提升(23.44%:18,70%)。
CytoFLEX 能明顯的區分淋巴細胞增殖的不同代數,從圖中看至少有明顯的5 代細胞,而且CD19 陰陽性區分也十分明顯,體現出了出眾的儀器靈敏度與分辨率。

發布者:貝克曼庫爾特生命科學
聯系電話:400 168 5267
E-mail:apls@beckman.com

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