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血清使用常見問題

瀏覽次數:2403 發布日期:2015-10-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

血清使用常見問題

1、血清保存的最好方法?

建議血清最好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建議無菌分裝于適當的滅菌容器內冷凍備用。

2、如何解凍血清,才能保證其質量不會受損?

我們建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過程中必須規則地搖晃均勻。

3、為什么血清在解凍后會出現絮狀沉淀?應該怎樣處理?

血清中絮狀沉淀產生的原因有很多,其中最普遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,這也是造成沉淀的主要原因,但這些絮狀沉淀并不影響血清本身的質量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者將血清分裝于無菌離心管中,2000~3000rpm離心5min。一般不建議用過濾的方法去除絮狀沉淀,因為沉淀會阻塞濾膜,造成過濾困難或無法過濾。

4、為什么要熱滅活血清?有必要熱滅活嗎?

加熱可以滅活血清中的補體系統,使補體去活化。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細胞和巨噬細胞,同時還能夠參與溶解細胞的過程。

諸多研究表明大多數細胞的培養無須進行血清的熱滅活;而在免疫學研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養過程中,推薦使用熱滅活血清。實驗顯示,經正確熱滅活處理的血清,對細胞的生長只有微小的促進或完全沒有促進作用,而通常因為高溫處理影響了血清的質量,造成細胞生長速率降低。并且熱處理過的血清,沉淀物明顯增多,倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點”,往往會使研究者誤以為是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又會更增多,有會使研究者誤認為是微生物的分裂增殖。因此我們建議若非必須,可以不進行熱處理,既節省時間又確保質量。

5、如何避免沉淀物的產生?

我們建議您在血清使用的過程中,采用正確的解凍方法(冷凍→4℃→室溫,參考Procell血清產品使用說明),若血清解凍時改變的溫度太大(如冷凍→37℃)非常容易產生沉淀物。

溫度過高、時間過久、搖晃不均勻等,都會造成沉淀增多,我們建議如非必要無須對血清進行滅活;若必須熱滅活,應嚴格遵守56℃,30min的原則,并隨時搖晃均勻。

發布者:武漢普諾賽生命科技有限公司
聯系電話:027-82917608
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