大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒技術(shù)原理
大鼠(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒技術(shù)原理
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產(chǎn)品名稱：大鼠(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒技術(shù)原理
英文名稱：Rat neutrophil activating protein-2,NAP-2 ELISA Kit
產(chǎn)品編號：QY-SZ2079
產(chǎn)品性狀：液體
產(chǎn)品用途：科研實驗專用
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
客服電話：021-51867124 QQ：3063139112 郵件：3063139112@qq.com
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
試劑盒組成：
封板膜:2片（48）/2片（96）
說明書:1份
密封袋:1個
標準品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
酶標包被板:1×481×962-8℃保存
樣品稀釋液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑A液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
顯色劑B液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
終止液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存
標本的采集及保存
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
4. 細 胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右 （2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組 織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
