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用TL2020自動冷凍研磨儀進行玉米葉片液氮研磨的實驗方法

瀏覽次數:4233 發布日期:2015-1-29  來源:鼎昊源科技www.dhsbio.com

目的:

批量研磨玉米葉片,為后續提取核酸,進行遺傳或生理生化指標分析研究提供方便。為種子和農產品質量管理部門、種子公司等單位利用分子方法檢測樣品純度、檢測純度真實性等實驗所必需的樣品前處理工作提供參考。

地點:某種業育種和栽培實驗室

材料:新鮮玉米幼苗葉片

儀器:主機,TL2020自動冷凍研磨儀(又名TL2020高通量組織研磨儀);配件:2ml研磨適配器,直徑35mm研磨鋼珠

1TL2020自動冷凍研磨儀

步驟:

1)取樣:取新鮮玉米幼苗葉片,剪成直徑6~8mm大小碎片;

2)將3-5片葉片碎片置于2ml離心管(EP管)中,同時加入15mm23mm不銹鋼研磨鋼珠。

3)將加入葉片和研磨鋼珠的EP管蓋嚴密封,放入TL2020自動冷凍研磨儀2ml研磨適配器中,然后和適配器一起整體浸入液氮中冷凍2-3分鐘或至液氮不“沸騰”為止。

4)使用DHS特制的液氮研磨操作提籃迅速從液氮中取出適配器,并迅速將其固定在研磨儀的搖臂中;

5)設置TL2020的研磨時間為2分鐘,研磨頻率1500rpm1500/分鐘)。

結果:

得到非常細碎的葉片粉末,后續提取核酸效果很好。

結論:

TL2020自動冷凍研磨儀進行玉米葉片的液氮研磨,可以直接將研磨管和適配器浸泡在液氮里,只需一次性1-2分鐘的液氮冷凍處理和一次約2分鐘的研磨,就能批量粉碎多達562.0ml的樣品(用96孔深孔板的話則是192個樣品)。處理時間迅速,有效防止了溫升,為后續有效提取核酸提供了保障。此外,還大大節省液氮,操作也更加安全。

發布者:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
聯系電話:010-58650065
E-mail:chenyajing@herosbio.com

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