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微粒研究中的流式分析方法

瀏覽次數:2852 發布日期:2014-6-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
循環微粒(circulate microparticle, cMP)是細胞激活、損傷或凋亡后從細胞膜脫落的直徑小于1μm的小囊泡。在糖尿病、心血管疾病、艾滋病、慢性炎癥性疾病中,發現循環微粒水平升高,且它的一些生物學活性如細胞間生物活性信號的傳導,免疫調節血管生成組織修復等,與疾病的發生發展息息相關。對于它的認識還在不斷地探索,其研究也越來越多。
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循環微粒流式分析方法視頻講座


 
循環微粒與凋亡小體、外來體不同,凋亡小體是細胞凋亡時以出芽方式形成的,直徑大于 1μm;而外來體是由細胞活化后釋放的囊泡顆粒,以外分泌的形式釋放出來,直徑大小為10.0nm ~ 100nm 。循環微粒的直徑約為 0.1μm - 1μm,它們與母細胞有相似的基本特征。
 

目前微粒的檢主要通過ELISA和流式細胞儀進行檢測。ELISA方法易受其他可溶性抗原的干擾,而全血或者血漿的儲存時間和方式、樣本的處理方式、不同的檢測方法等均會影響微粒檢測的結果。流式細胞儀檢測方法提供了更有效、快捷的分析微粒分析能力,現已有多種流式細胞標記物可用于檢測微粒,它們主要用于檢測微粒的活化狀態及其細胞來源。但流式細胞儀檢測的微粒由于波長的限制,直徑小于0.3μm-0.5μm的微粒難以檢測。

 

Apogee流式細胞儀

 

靈敏度100nm, 分辨率10nm: 利用Apogee A50突出的高靈敏度和分辨率,Apogee A50可以清晰的將直徑相差10nm以上的微粒樣本進行分群、計數、分析。

 

快速的數據獲取性能,可高達100,000 events/sec,高濃度微粒樣本的分析能力。

 

高靈敏、多通道熒光檢測能力:cMP特定抗原熒光抗體的靈活使用,微粒功能、來源的精確分析。

 

“Overcoming Limitations of Microparticle Measurement by Flow Cytometry”-Romaric,  Philippe, SEMINARS IN THROMBOSIS AND HEMOSTASIS/VOLUME 36, NUMBER 8 2010 

 

微粒檢測適用于以下多種疾病研究:

 

心血管疾病

血栓性疾病

急性冠脈綜合征 Acute coronary syndrome 

肝素誘導性血小板減少癥
Heparin-induced thrombocytipenia 
Myeloproferative syndromes
 )

動脈粥樣硬化 Atherosclerosis 

貧血(Sickle cell disease

靜脈栓塞Venous thrombosis

陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria )

中風Stroke 

… 

自體免疫疾病

心血管危險因素

Antiphospholipid syndrom

糖尿病 Diabetes

紅斑狼瘡 Lupus

高血壓 Hypertension

TTP

代謝綜合征 Metabolic syndrome 

ITP

慢性腎功能不全 Chronic renal insufficiency

PAR 

血脂紊亂 Dyslipidemia

傳染、炎癥性疾病

腫瘤

敗血癥 Sepsis 

HIV

 
 
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