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ionKey/MS優化血漿中緩激肽SPE LC-MS/MS定量檢測方法

瀏覽次數:1767 發布日期:2014-3-27  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

Mary E. Lame,Erin E. Chambers,and Kenneth J. Fountain
Waters Corporation,Milford,MA,USA

應用優勢
■ 樣品量減少2倍、靈敏度提升10倍,可以方便進行樣品的多次進樣,更好的滿足ISR重復分析需求。
■ 溶劑耗量減少50倍,節省分析成本。
■ 采用混合模式SPE,可以減少基質干擾,增強在血漿中緩激肽萃取的選擇性。
■ Oasis µElution96孔板可濃縮樣品,并在最大程度上減少肽損失,使血漿中緩激肽的檢測限達到5 pg/mL。
■ 選擇性高的快速SPE提取(<30分鐘)省去了耗時的免疫親和純化步驟。

沃特世解決方案
ionKey/MS®系統
ACQUITY UPLC®M-Class
IonKey™源
Xevo® TQ-S
iKey™ 分離裝置
MassLynx™
Oasis®WCX 96孔µElution板
ACQUITY®采集板

引言
對多肽類物質進行穩定、靈敏分析的需求是色譜分離和質譜測定的共同挑戰。常見的肽通常難以通過LC-MS/MS進行分析,這是因為其不易離子化以及不易產生理想的碎片離子而導致MS靈敏度較低,從而使得LC和樣品制備方法開發非常困難。之前的應用紀要(720004833ZH)詳細說明了如何開發一種快速、靈活的SPE-LC-MS/MS分析方法,用于人血漿中緩激肽(圖1)的定量;緩激肽是臨床前或藥物開發階段重要的生物標志物1。由于緩激肽在血漿中的濃度低至pg/mL水平且代謝速度快,在采血和樣品制備過程中還可通過蛋白水解人為生成,因此對其進行準確定量相當困難。

在本實驗中,使用ionKey/MS系統更新了整個LC-MS平臺,新系統把UPLC®分析集成到質譜源中(圖2)。如圖3所示,iKey分離裝置(150 µm內徑)包含流路、電子元件、ESI接口、加熱器、eCord和色譜填料以發揮UPLC分離性能。此外,與2.1 mm內徑色譜法進行比較,這種技術可顯著提高靈敏度,是肽分析的理想方法。大多數生物分析LC-MS/MS方法常常消耗大量的溶劑和樣品,從而增加了分析的成本和限制了可重復分析次數。除靈敏度增加外,ionKey/MS減少溶劑和樣品耗量,提供足夠的樣品進行重復進樣,更好的滿足ISR測試需求。

下載應用紀要請點擊:http://www.waters.com/waters/library.htm?lid=134786602&cid=511436

發布者:沃特世科技(上海)有限公司
聯系電話:800(400)8202676 (免費電話支持專線)
E-mail:Jackie_qian@waters.com

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