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禽甲型流感病毒的分離和采集

瀏覽次數:4319 發布日期:2013-4-9  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
最近幾天,H7N9的案例讓人們不禁發出“禽流感又來了!”的感嘆。

其實,禽流感跟人流感一樣,它一直都沒走,并時常在禽群里發生。而它的可怕之處不在于它一直的存在,而在于它“不斷的變異”和“從不傳染人,到禽傳人、人傳人”。

流感病毒可分為甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。其中,甲型流感依據流感病毒特征可分為H×N×共135種亞型,H7N9亞型禽流感病毒是其中的一種。禽甲型流感病毒除感染禽外,還可感染人、豬、馬、水貂和海洋哺乳動物。可感染人的禽流感病毒亞型為H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3,此次報道的為人感染H7N9禽流感病毒。

禽甲型流感病毒顆粒呈多形性,其中球形直徑80~120nm,有囊膜。基因組為分節段單股負鏈RNA。依據其外膜血凝素(H)和神經氨酸酶(N)蛋白抗原性不同,目前可分為16個H亞型(H1~H16)和9個N亞型(N1~N9)。該病毒為新型重配病毒,其內部兩個基因片段來自禽間H7N9病毒,還有6個來源于禽間的H9N2病毒,沒有豬的基因片段。

如何在人群中預防和檢測H7N9病毒不是本文目的,本文主要說明如何借用實驗室設備從病禽組織樣品分離毒株以及從禽舍空氣采集禽甲型流感病毒。

從病禽組織樣品分離禽甲型流感病毒:
1. 取病禽肺組織200mg,放入CK28研磨管中
2. 加入TE緩沖液1ml
3. 在Precellys24生物樣品均質器上按照參數“6500rpm,30s, 2cycles”處理
4. 5000rpm離心取上清(禽甲型流感病毒即存在于上清中,可用于PCR檢測)


precellys 24 樣品均質器

從禽舍空氣采集禽甲型流感病毒:
1. 準備Coriolis μ空氣生物采樣器及LTM套件
2. 在進樣瓶里添加TE緩沖液并連接采樣杯
3. 設置200 L/min采樣速率采集1hr
4. H7N9病毒即存在于采樣杯液體中,可用于PCR檢測


Coriolis μ 空氣生物采樣器 

注:Coriolis μ空氣生物采樣器須選配LTM套件才能有效用于禽甲型流感病毒采集;采集時間不少于1hr;因病毒在溶液里超過30分鐘就會失活,建議盡快進行下游PCR實驗。

發布者:奧然科技有限公司
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