使用中已經(jīng)出現(xiàn)的問題：

1、有客戶沒有仔細(xì)閱讀說明書，使用QuickAntibody佐劑時按照弗式佐劑方法與抗原進(jìn)行乳化等操作，并在4度冰箱放置過夜，第二日取出直接免疫，結(jié)果造成效價不理想。

答復(fù)：QuickAntibody佐劑無需乳化，而且無論是佐劑本身還是與抗原混合后，長時間靜置均易產(chǎn)生沉淀，因此均需要搖勻后才能配制和注射。

2、有客戶沒有仔細(xì)閱讀說明書，使用QuickAntibody佐劑之前發(fā)現(xiàn)佐劑里面有沉淀成分，以為是污染物，離心去除，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果效價不理想。

答復(fù)：QuickAntibody佐劑產(chǎn)生沉淀為正常現(xiàn)象，只需在用前搖勻即可，若離心去除，必然影響免疫效果。

3、有客戶使用QuickAntibody佐劑免疫小鼠后腿小腿肚肌肉時，誤把踝關(guān)節(jié)當(dāng)成膝關(guān)節(jié)，從而使免疫部位太過偏下，免疫100ul的佐劑與抗原混合液時，大量液體流出。

答復(fù)：小鼠后腿大腿一般被腹部皮膚包裹，我們正常見到的后腿肌肉部分為小腿肌肉。另外若免疫至踝關(guān)節(jié)，由于免疫部位距離發(fā)生有效免疫應(yīng)答部位較遠(yuǎn)，抗原在擴(kuò)散至淋巴結(jié)前容易被降解，導(dǎo)致免疫應(yīng)答效率降低。

4、有客戶使用QuickAntibody佐劑免疫小鼠，因動物較多，免疫時間較長，最后佐劑在針管中沉淀在管壁，導(dǎo)致前面免疫的小鼠抗體效價較高，后面免疫的小鼠抗體效價較低。

答復(fù)：QuickAntibody佐劑易產(chǎn)生沉淀，建議在熟練使用之前，每次抽取較少量佐劑與抗原混合物進(jìn)行免疫（以二、三只小鼠用量為佳）；在操作熟練后，可以適當(dāng)增加免疫動物的數(shù)量（如每抽取一次免疫五只以上小鼠）。

5、有客戶使用QuickAntibody佐劑制備單抗，抗原為多肽偶聯(lián)載體蛋白，免疫兩針后針對多肽的ELISA滴度僅為1:200，但是成功融合出4株雜交瘤細(xì)胞株，其中兩株產(chǎn)生的單抗可以做免疫組化，完全達(dá)到他們的預(yù)期結(jié)果！

答復(fù)：我們說明書中所說的效價為蛋白抗原免疫后的效價，對于多肽和小分子來說，免疫后不可能達(dá)到如此高的滴度！原因是多肽和小分子為半抗原，本身只有一個表位或不足一個表位，而蛋白抗原有成百上千個表位。建議客戶檢測針對載體蛋白的ELISA滴度，如果達(dá)到說明書滴度范圍，而且檢測到一定水平的多肽或小分子滴度，則表明免疫成功，完全可以繼續(xù)后續(xù)的融合工作。此時多肽或小分子滴度高低取決于該表位的免疫原性和偶聯(lián)效率，基本與佐劑無關(guān)！然而，與蛋白抗原相比，多肽或小分子單抗的陽性克隆率則要低得多，因此客戶需要篩選更多的克隆。