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總GLP-1酶免試劑盒使用說明書

瀏覽次數:1569 發布日期:2011-7-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

GLP-1酶免試劑盒


【預期用途】

該高靈敏度ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是專門用來定量檢測血漿樣本中的胰高血糖素樣肽-17-36[GLP-11-36]和(9-36[GLP-1(9-36)]的總濃度。哺乳動物的GLP-1肽鏈的基本氨基酸序列完全相同,如:小鼠、大鼠、豬、狗、猴、人等。該試劑盒僅適用于科學研究。

 

【實驗原理】

ELISA的設計,研發和生產的目的是對血清樣品中的活性GLP-17-36)和GLP-1(9-36)進行定量檢測。它是基于運用兩個GLP-1特異性抗體與兩個位點結合的“雙位點夾心”技術。

將標準品、質控品、和待測樣品加入鏈霉親和素包被的微孔板中。隨后,將生物素偶聯的GLP-1特異抗體和HRP標記的GLP-1特異抗體混合物添加到各個孔中。經過第一個保溫孵育期,形成了“鏈霉親和素-生物素抗體- GLP-17-36/(9-36)-HRP標記抗體”的“雙位點夾心”結構,該復合體被微孔板的內壁吸附住。游離的HRP標記抗體和緩沖基質則在洗滌過程中被沖走。微孔板加入過氧化物酶基質(3,3',5,5'-四甲基聯苯胺,TMB)并經過一段時間的反應后,然后用酶標儀測量吸光度。微孔板內壁的免疫復合體與GLP-17-36/(9-36)的連接酶活性與樣本中的總GLP-1數量成正比。

 

 

簡要實驗步驟

 

  • 在各指定孔中分別添加100µL標準品、質控品和病人樣本;
  • 在各孔中添加100µL抗體混合物;
  • 2-8靜置培養20-24小時;
  • 用洗滌緩沖液稀釋液洗凈條帶;
  • 在各孔中添加200 µLTMB基質;
  • 室溫下靜置20分鐘;
  • 添加50 µL終止液;
  • 讀取450nm/620nm450nm/650nm下的吸光度。

標簽: GLP-1
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