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抗體選擇指南

瀏覽次數:7352 發布日期:2011-3-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
抗體選擇指南
 
    抗體親和層析原理是蛋白 A和蛋白 G對不同來源的IgG的Fc-區具有高度親和性和特異性。這些蛋白被固定在我們的許多填料上,產生了從腹水、細胞培養上清液和血清中分離IgG和IgG亞類的極好方法。關于抗體親和純化的全部產品系列,見下頁抗體親和填料和層析柱選購指南。
 
    蛋白A (Protein A) 來源于金黃色葡萄球菌的一個株系,它含有5個可以和抗體IgG分子的Fc段特異性結合的結構域,可以特異性的和樣品中的抗體分子結合,而使其他雜蛋白流穿,具有極高的選擇性,通常一步親和層析就可達到超過95%的純度。ProteinA sepharoseCL-4B,是將從金黃色葡萄球菌表達純化出蛋白A通過CNBr的方法偶聯在sepharose CL-4B的介質上,可以純化體液或細胞培養液中的免疫球蛋白。nproteinA sepharose4FF,nprteinA即為天然 (Native ProteinA),表示其在生產過程中沒有引入任何動物來源的組分。rproteinA sepharose4FF,重組的蛋白A (rProtein A),經基因工程改造后含有一個C末端半胱氨酸,可以單一位點定向偶聯于瓊脂糖骨架上,有效降低空間位阻,增加了與IgG 的結合能力。同時配基在發酵和純化過程中沒有引用人源的IgG,避免了人源IgG的污染風險。rmpProteinA,多位點附著的技術,保證更低的配體的脫落。一步高度純化單抗和多抗。
 
    2005年GE推出了新一代的MabSelect ,是第一個使用高流速瓊脂糖凝膠 ( High flow Agarose) 作為骨架的新型蛋白A層析介質,專為大規模抗體純化而設計。相比傳統Fast Flow填料,高流速瓊脂糖具有高流速高載量,更低的配體脫落,易于清洗與除菌消毒,壽命更長、更經濟,適合快速高效的進行抗體生產和放大,已經成為治療用單抗純化和放大的標準介質。2011年又推出了新產品MabSelect LX,更高的動態載量60mgMab/ml,更大的降低了成本
 
    蛋白G是G族鏈球菌的一種細胞表面蛋白,是Ⅲ型Fc-受體,與IgG結合類似于蛋白 A,以非免疫機制結合。我們提供的是其天然蛋白的白蛋白結合區域被基因敲除后在大腸桿菌中表達的重組蛋白形式(HiTrap Protein G HP、Ab SpinTrap、ProteinG Sepharose 4 Fast Flow、GammaBind G Sepharose和GammaBindPlus Sepharose),重組蛋白 G含有兩個Fc結合區。也提供預裝有Protein G SepharoseHigh Performance填料的Ab SpinTrap層析柱,它可以通過離心的方式方便地捕獲和純化單克隆和多克隆抗體。
 
    盡管蛋白A和蛋白G親和填料在許多方面是類似的,但對IgG的特異性卻不同。對一般抗體捕獲蛋白G親和填料是一種很好的選擇,因為它可以結合廣范圍的真核類生物表達的IgG,并且可以結合更多的IgG亞型。

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