韩国免费A级作爱片无码_亚洲欧洲精品成人久久av18_亚洲国产成人AV毛片大全_成年人在线免费看的惊悚动作片_一级爽片_爱爱免费

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 膜片鉗實驗系統配置

膜片鉗實驗系統配置

瀏覽次數:5218 發布日期:2008-5-9  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
一個電生理配置有4個主要的需求:

環境需求:保持標本的健康的手段。

光學需求:顯現標本以供觀察的手段。

機械結構需求:穩定定位微電極的手段。

電子學需求:放大和測量信號的手段。


我們將配置分成兩種類型的“典型”配置:胞外記錄和單通道膜片鉗記錄。

胞外記錄的配置

該配置主要用于記錄腦片的場電位。一般目標是將一個相對粗糙的電極放置在組織的胞外空間,同時盡可能模仿體內的組織環境。因此,需要一個相當復雜的小空腔,用來對組織進行溫暖、氧化、灌注。而另一方面,光學和機械結構需求則簡單得多。一個解剖用顯微鏡,至少15cm的工作距離(配合近似垂直放置的微操縱器),通常已經可以看到切片或大體的形態學特征。由于對定位時手的震動和電極的精確放置都沒有苛刻要求,微操縱器可以選用相對粗糙的機械類型。但是,在記錄過程中,微操縱器不允許有一點漂移和震動。

需要使用低噪聲的電壓放大器。由于信號的范圍可能在10 uV 到10 mV 范圍內,低噪聲電壓放大器的增益至少要達到1000。

單通道膜片鉗記錄配置

標準的膜片鉗配置在許多方面與胞外記錄恰好顛倒過來了。由于對環境的控制非常少,實驗通常在室溫下、一個無灌注的培養皿中進行。

光學和機械需求則根據實際的細胞的大小(10或20 um)有特殊的規定。顯微鏡應該有放大300或400倍的能力,并需要某種對照增強能力(Nomarski, Phase or Hoffman)。omarski(微分干涉)對于電極的精確放置是最好的,因為它的影像依賴于視野一個很窄的深度上,這有助于精確定位(定位不好,影像是模糊的)。Phase(相差法)用于精確定位程度要求低一些的場合,但提供了更好的對比度。Hoffman方法提供了較便宜的,稍微退化點的Nomarski版本。

最好使用倒置顯微鏡:

(1) 這樣能使電極頂端更容易被看到,因為物鏡在chamber的下方,

(2) 提供了更大更堅固的平臺,用來固定微操縱器。

微操縱器應提供良好的,平滑的移動(最多每秒2um)。對震動和穩定性的需求決定于記錄模式:是希望記錄cell-attached- patch,還是cell-free (inside-out or outside-out) patch。

在cell-free- patch中,微操縱器只需要在形成封接過程中保持穩定,一旦離開了細胞,穩定就不是那么至關重要了。這通常不到一分鐘。

單通道記錄的放大器比胞外記錄使用的要復雜得多。象Heka公司的EPC9,EPC10以及Axon公司的Axopatch200B都是非常優秀的膜片鉗放大器。

組織切片膜片鉗記錄配置

膜片鉗技術的近來擴展,切片膜片鉗技術,其配置需要是體外胞外記錄和常規膜片鉗配置的一個組合。例如,該技術可能需要一個chamber,需要連續對切片進行灌流和供氧。大部分的其他要求,與常規膜片鉗類似。光學需求與切片的厚度有關(thick-slice or thin-slice),對thick-slice,簡單的解剖顯微鏡就夠了;而對thin-slice,顯微鏡則需要提供400倍的放大,良好的頂端聚焦和對照增強。

設備放置:

電生理實驗人員傾向于在小房間的一角獨自工作。小房間通常比較安靜,震動和空氣流動被削減了。

首先放置顯微鏡是比較明智的,然后是密切聯系的附件,例如chamber,微操縱器和溫度控制系統(如果安裝了)。基本原則是第一要保證細胞恰當的處于靜止狀態,第二要確認從細胞記錄信息的行為沒有對細胞帶來連續的致命傷害。

第一原則可以通過良好的實驗環境幫助實現,第二原則通過良好的光學和機械手段實現。

在顯微鏡周圍工作,保持例如灌注閥門和微操縱器的控制要非常謹慎,避免震動。理想的情況是,它們放置在一個小架子上,該架子從防震臺延伸出來,保證在通過顯微鏡觀察細胞時,不會產生破壞的震動。

選擇和放置電子儀器是個人偏好的事情。最低的要求是只有一個放大器和一臺計算機,另外強調最好放置在一個儀器架上。一個示波器是重要的,因為,計算機通常不夠靈活;而且,示波器常能展現在計算機屏幕上看不到的一些意外情況,例如計算機的采樣率設置不合適時,就會丟失大量細節信息,而示波器則不會。

示波器應與眼睛水平,在示波器上面或下面直接放置微電極放大器,以便容易的調整和監視信號。

最后,計算機應放置得盡可能遠,但離顯微鏡還是應該保持在手臂來回夠得著的地方。這有助于削減顯示器的輻射噪聲,也能確保在使用鍵盤匆忙記錄時不至于肘部撞擊顯微鏡。

最后一般的建議,也許是最難注意的是:抵制十全十美的配置誘惑,只要有一半的可能性,就開始實驗。

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 免费看啪啪人A片AAA片 | 美女黄网站人色视频免费 | 国产成人综合在线观看 | 国产成人无码A片免费男男中文 | 亚洲精品中文字幕无码A片老 | 日产精品自产拍高潮在线观看 | 男人操女人免费 | 亚洲伊人久久综合影院 | 红桃AV一区二区三区在线无码AV | 国产色情强伦免费视频 | 国产尤物AV尤物在线看 | 日韩区在线观看 | 久久夜色精品国产欧美 | 四虎影视精品永久在线观看 | 中国XXXX真实偷拍 | 无码人妻精品一区二区三区东京热 | 无码毛片一级片特黄 | 四虎久久久久 | 国产免费天天看高清影视在线 | 亚洲国产午夜精品理论片 | 我和漂亮邻居少妇偷晴 | 人与动人物xxxx毛片在线播放 | 日本高清一二三区视频在线 | 开心久久婷婷综合中文字幕 | 欧美精品cum4k高潮 | 国产精品麻豆自拍 | 精品欧美国产一区二区三区 | 在线观看一区二区精品 | 久久精彩免费视频 | 日本一区二区三区高清无卡 | 国产特黄a级在线视频 | 日本高清不卡中文字幕视频 | 激情综合婷婷丁香五月俺来也 | 欧美在线视频一区二区三区 | 在线A级毛片无码免费真人 免费a观看 | 鲁丝片一区二区三区免费 | 国产精品一区二区三区三州 | 秋霞在线观看片无码免费 | 欧美ⅴa| 成人免费福利片 | 国产成人久久AV免费高清 |