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脂多糖LPS的穩定性介紹和化學分解作用

瀏覽次數:1510 發布日期:2024-1-10  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
 熱穩定性

LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)中性溶液在室溫放置數月,其生物學活性不發生明顯的改變,在4℃或低溫冰箱中,其生物學活性可保持數年至數十年。冷凍干燥的LPS中性粉劑,在室溫或冰箱條件下可放置幾十年或更長時間而不失去其生物學活性。
 

LPS的穩定性和化學分解


細菌LPS具有很強的耐熱性,一般的高壓滅菌不能使其滅活,115℃ 30 min的濕熱僅能破壞25%左右的內毒素活性。內毒素在50%相對濕度下可被環氧乙烷去除活性。當LPS的水溶液在不同溫度下處理時,發現在200℃ 1h仍能檢測出內毒素活性,而進一步加熱到250℃ 30~45min,或180℃ 3~4h則活性完全消失。我國2000年版藥典內毒素檢查法規定,玻璃器皿的熱原處理為250℃干烤1h以上。

酸堿穩定性
室溫條件下LPS在酸性溶液中可發生部分降解,這主要由核心多糖與Lipid A間糖苷鍵的裂解引起,在加熱的條件下這一反應可加速。在0.1N醋酸中,100℃, 45min可使LPS失去90%的生物活性。在加熱條件下﹐強酸溶液可使LPS分子徹底破壞。50%的枸櫞酸(pH 1.0)可水解 Lipid A 的磷酸基團或羥基脂肪酸等活性基團。堿性因素主要導致Lipid A骨架上連接的磷酸酯鍵及脂肪酸酯鍵水解,使Lipid A 結構受到破壞,從而導致LPS分子失去活性。故LPS宜在中性﹑低溫的條件下保存。

輻照對LPS的影響
長時間(48h)、大劑量的Co60照射后,LPS的結構可以被完全破壞。如有條件,對不能用干烤處理的實驗器具,可用長時間,大劑量的輻照清除LPS。

氧化劑對LPS活性的影響
過氧化氫是一種強氧化劑,具有防腐、滅菌、除臭及清潔等作用。它分解后能釋放大量新生態氧,可氧化分解LPS。過氧化氫主要裂解LPS中Lipid A還原端C1位的磷酸基團。產生的單磷酸LPS,使其毒性下降,實驗證明,單磷酸的Lipid A毒性明顯弱于野生型的Lipid A,這與過氧化氫降解LPS后毒性下降結果相符。

用鱟試劑檢測常用氧化消毒劑對大腸桿菌內毒素的滅活作用,結果顯示,氯石灰溶液(含5000mg/L有效氯)在20℃作用30min、氯胺T溶液(含5000mg/L有效氯)在20℃作用70min可滅活95%以上的LPS活性。在60℃加熱條件下,氯胺T滅活同量內毒素僅需40min,0.2%酸性高錳酸鉀作用2min、1.0%中性高錳酸鉀作用160min可滅活95%以上的LPS。
發布者:科德角國際生物醫學科技(北京)有限公司
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