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單細胞蛋白質組學技術攻克神經免疫研究中的挑戰

瀏覽次數:1611 發布日期:2022-4-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

神經炎癥是對神經組織損傷的一種復雜生物反應,它在神經退行性疾病中起著關鍵作用。然而,由于細胞因子產生的異質性和異常的細胞因子特征,可能很難對其評估。
 

 

為此,IsoPlexis開發了創新性的單細胞蛋白質組學平臺,可以對每個細胞的功能進行定義,從而深入探討神經免疫作用機制,以加速開發更有效的治療。

 

如果僅僅是對細胞表面表型或RNA轉錄水平分析,可能會錯過發現胞外和胞內的功能表型差異,從而無法揭示患者反應的生物學驅動因素。

 

傳統蛋白檢測技術往往只能分析樣本中所有細胞分泌的蛋白平均水平,而IsoPlexis技術通過定義每個細胞的功能表型,可發現傳統方法無法發現的細胞個體差異,從而揭示神經炎癥和神經毒性的細胞功能機制。已有研究表明,每個異質性免疫細胞產生的某些特定細胞因子對于疾病發生發展至關重要。IsoPlexis單細胞功能蛋白組學技術有助于實現單細胞水平上的神經炎癥特征分析。

 

下面我們將重點介紹利用我們的技術解決的三個挑戰/應用:

 

應用1 - 了解神經炎癥的疾病進展機制

功能表型揭示了額顳葉變性(FTLD)患者的外周血單核細胞差異

 

由于免疫細胞的功能異質性和免疫反應的復雜性,找到一種可以預測免疫治療效果和不良反應的生物標志物往往非常困難。使用IsoCode單細胞芯片與蛋白質條形碼技術,研究人員可以對單個活細胞分泌的多達30+種蛋白質進行分析,從而準確評估每種免疫細胞的多功能異質性。

 

IsoCode單細胞芯片

 

通過IsoPlexis單細胞分泌蛋白質組技術研究FTLD疾病機制,揭示:

1.在FTLD患者中CD14+CD16-和CD14+CD16+單核細胞的分泌蛋白組呈現多樣化趨勢。

 

 

2.與健康對照組相比,FTLD患者的單核細胞亞群多功能性顯著增加。

 

 

3.具有獨特細胞因子特征的炎性多功能單核細胞亞群的增加,可能為FTLD特有的外周血免疫病理生物標志物奠定了潛在基礎。

 

應用2 – 固有免疫在多發性硬化(MS)發病機制中的作用

用功能表型評估MS中功能失調的固有免疫細胞亞群

 

微生物群和固有免疫在多發性硬化(MS)疾病進展中的作用仍不清楚。有研究報道,與健康人相比,MS患者血液中微生物脂質的水平顯著降低,而該脂質可以通過TLR2刺激固有免疫細胞,提示MS患者的微生物群固有免疫調節功能缺陷。研究人員認為,由此產生的TLR2反應性增強在MS疾病進展中有重大影響。

圖示:TLR2介導的免疫耐受對MS發病機制的影響

 

這項研究的目的是利用各種技術方法來表征MS患者的TLR2反應特點。作者比較了26例MS患者和32例健康供者作為對照,發現研究中50%的MS患者對TLR2刺激的反應性增強,而健康對照組僅有9.3%。更重要的是,TLR2反應增強的患者中包含高比例的MS惡化患者,其中一部分對適應性免疫系統靶向療法無效。這些結果有助于進一步了解固有免疫在MS中的作用。

 

 

該研究要點:

  • IsoPlexis單細胞分泌蛋白組發現了一種與MS病理和治療相關的Toll樣受體(TLR),以前從未發現。

  • TLR2反應增強的MS患者,有比較大的概率出現疾病惡化。

  • 鑒于單核細胞多功能性可以揭示不同形式疾病對治療反應的差異性,因而可用于MS患者分層,突顯了單細胞蛋白質組學技術的強大。

 

應用3 - 神經毒性和免疫相關不良事件(IRAEs)的生物標志物

CAR-T細胞回輸患者前的產品指標與3級以上細胞因子釋放綜合癥(CRS)有獨特的關聯性

 

已有研究報道,CAR-T細胞治療后,IL-15升高和CAR T細胞的擴增與非霍奇金淋巴瘤(NHL)的治療結局有關。然而,回輸前CAR產品的T細胞功能與臨床結局的相關性尚無報道。

 

在這項研究中,在NHL患者回輸CD19 CAR-T產品前的單細胞蛋白質組分析表明,CAR-T產品含有多功能性T細胞亞群,可產生多重免疫反應,且回輸前CAR-T細胞產品的T細胞多功能性指數(PSI)與臨床反應顯著相關。此外,PSI與CAR-T細胞擴增或治療前血清IL-15的升高相結合,也與NHL患者的臨床結局顯著相關。

 

Kite Pharma開發的CD19 CAR-T細胞治療產品在回輸患者前,

通過IsoPlexis技術檢測細胞多功能指數(PSI)示意圖

 

回輸前CAR-T細胞產品的多功能指數(PSI)與NHL患者的臨床預后及>3級CRS的相關性

 

IsoPlexis功能蛋白質組學技術的重點以及與CRS的相關性:

  • · IsoPlexis單細胞分泌組揭示了炎癥功能表型結合CAR峰值或治療前血液中IL-15水平,與3級以上的神經毒性(NT)相關。

  • · IL-17A的細胞多功能指數(PSI)結合D0天IL-15水平與≥3級NT有顯著相關性,這表明產生IL-17A的多功能細胞亞群在神經系統毒性中的關鍵作用。

 

  • · 外周血單個免疫細胞的分泌譜從根本上影響了對與免疫療法相關的不良事件發生機制的理解。

 

全自動免疫細胞單細胞功能解決方案

 

IsoPlexis單細胞分泌蛋白質組解決方案通過分析每個免疫細胞的功能性免疫狀況獲取完整的單細胞功能表征,從而發現更好的生物標志物,并加速醫學發展。通過檢測罕見的 "超級細胞 "亞群,以揭示持久性、效價強度、穩定性等等的功能性生物驅動因素。

發布者:上海瑋馳儀器有限公司
聯系電話:18521301252
E-mail:xiaojing.su@weichilab.com

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