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IL-12/P40 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):228 發(fā)布日期:2021-4-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
 IL-12/P40 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書

產(chǎn)品簡稱:  IL-12/P40 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒 
英文名稱:Porcine Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA Kit
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
包裝:液體盒裝(48T/96T)
貯藏:2—8°C,避光防潮保存。
有效期:6個月

IL-12/P40 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒檢測中樣品的處理
1.細胞培養(yǎng)物上清:細胞培養(yǎng)物于室溫1000g,離心10分鐘后收集上清,并將標(biāo)本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血清:標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4.尿液:無菌收集取初尿,離心除去沉淀物,即可用于檢測,要長期保存尿樣,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿樣冰凍保護液放入-20℃冰箱長期保存。
5.組織勻漿:將組織標(biāo)本先用PBS洗滌,除去多余血液,勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜,再經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜,5000g,4℃離心5分鐘,取上清即可檢測。注:取樣和樣品處理過程中,防止有毒物質(zhì)對操作人員的危害,要采取相應(yīng)的保護措施。

IL-12/P40 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒elisa酶聯(lián)免疫試劑盒(間接法)
(1) 抗原包被:用包被液將PEDV抗原作1∶5稀釋包被反應(yīng)板,每孔100μl,同時設(shè)陰性細胞培養(yǎng)物對照孔,置4℃過夜。
(2) 洗滌:用洗滌液洗滌2次,每次2min,瀝干。
(3) 加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作1∶100稀釋,加入反應(yīng)板相鄰的兩個孔中,每孔100μl。同時作陰、陽性標(biāo)準(zhǔn)血清對照,置37℃孵育1h。
(4) 洗滌3次:方法同上。
(5) 加入酶結(jié)合物:用保溫液將酶結(jié)合物作1∶4 000稀釋,加入反應(yīng)孔中,每孔100μl,置37℃孵育1h。
(6) 洗滌3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔100μl,置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液:每孔50μl,靜置5min。
(9) 測定OD值:用檢測儀,于492nm波長,按儀器使用及制定標(biāo)準(zhǔn)要求調(diào)節(jié)儀器,測定各反應(yīng)孔的OD值,記錄結(jié)果。

IL-12/P40 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                  
發(fā)布者:上海一研生物科技有限公司
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