如何檢測食品飲料日常中的病原體
食物中最常見的病原體包括沙門氏菌、大腸桿菌、空腸彎曲菌、李斯特菌和諾如病毒。食用被細(xì)菌和/或細(xì)菌毒素、寄生蟲、病毒或化學(xué)物質(zhì)污染的食物或水會導(dǎo)致食物中毒。嚴(yán)重的食物中毒可能導(dǎo)致永久性殘疾或死亡。
空腸彎曲菌是彎曲的，桿狀的和微需氧的革蘭氏陰性細(xì)菌。它是腸胃炎的最常見病因之一，以腹瀉為主要癥狀。空腸彎曲桿菌的感染通常是由于食用了準(zhǔn)備不足的食物而引起的，包括未煮熟的肉（尤其是家禽），未經(jīng)處理的水或未經(jīng)巴氏消毒的生乳。空腸彎曲菌的傳統(tǒng)鑒定涉及培養(yǎng)，但是該細(xì)菌的微需氧特性使富集過程費力且昂貴。
李斯特菌已經(jīng)成為重要的食源性病原體，構(gòu)成了嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。李斯特菌在所有食源性病原體中的致死率最高，是一種兼性的細(xì)胞內(nèi)革蘭氏陽性細(xì)菌，可以在高溫和低溫，低pH下生存。它是牛乳腺炎的罕見病因。李斯特菌具有抵抗各種食品加工技術(shù)以及在低溫下生長的能力。已知與原料奶和巴氏殺菌奶以及奶酪等乳制品有關(guān)。而最易感染的是孕婦，新生兒和免疫功能低下的個體。
感染沙門氏菌的癥狀可能包括腹瀉，發(fā)燒，嘔吐和腹部絞痛，其中老年人，新生兒和免疫功能低下的人最容易受到感染。它是一種兼性厭氧型革蘭氏陰性細(xì)菌，可以在低溫和冷凍條件下存活。在每年由沙門氏菌引起的人類胃腸炎的13億例病例中，大多數(shù)是由于攝入了受污染的食品，例如生的或未煮熟的肉，海鮮和雞蛋，以及生的或未經(jīng)巴氏消毒的牛奶和奶制品。食用受感染肥料污染的新鮮水果或蔬菜后，沙門氏菌感染也會發(fā)生。
乳腺炎是導(dǎo)致奶產(chǎn)量和質(zhì)量下降的最昂貴的奶牛疾病。牛乳房發(fā)炎主要是由各種細(xì)菌感染引起的。無乳鏈球菌是牛患乳腺炎的細(xì)菌之一，具有高度傳染性，主要引起亞臨床感染，而牧民很難發(fā)現(xiàn)這種感染。無乳鏈球菌可在畜群內(nèi)廣泛傳播，由于產(chǎn)奶減少而造成損失。無乳鏈球菌是屬于B族鏈球菌的革蘭氏陽性細(xì)菌。
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| 指標(biāo)英文名稱 | 病原體指標(biāo) | 類型 | TaqMan PCR | 終點PCR |
| Campylobacter jejuni | 空腸彎曲菌 | 食物 | TM36100 | EP36100 |
| Listeria monocytogenes | 李斯特菌 | 食物 | TM30400 | EP30400 |
| Salmonella enterica | 腸沙門氏菌 | 牛奶 | TM32100 | EP32100 |
| Streptococcus agalactiae | 無乳鏈球菌 | 牛奶 | TM30600 | EP30600 |
| Streptococcus dysgalactiae | 鏈球菌性乳腺炎 | 牛奶 | TM30700 | EP30700 |
| Streptococcus uberis | 乳房鏈球菌 | 牛奶 | TM30800 | EP30800 |
PS: 所有試劑盒均已開發(fā)并驗證可與以下PCR儀器一起使用：
- Qiagen Rotor-Gene Q
- BioRad CFX96 TouchTM 實時PCR檢測系統(tǒng)
每種病原體有兩種形式檢測試劑盒，分別是：
TaqMan PCR檢測試劑盒特點：
- PCR對照以監(jiān)測PCR抑制情況并驗證質(zhì)量；
- 用于目標(biāo)和PCR對照檢測的預(yù)混液；
- 引物和探針混合物；
- 陽性對照和陰性對照以確認(rèn)試劑盒試劑的完整性。
終點PCR檢測試劑盒特點：
- 用于病原體基因組區(qū)域特異性擴(kuò)增的預(yù)混液和引物；
- 陽性對照和陰性對照以確認(rèn)試劑盒試劑的完整性；
- 加載染料和DNAladder以方便結(jié)果分析。
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Norgen Biotek成立于1998年，公司總部位于加拿大，是一家著名全球化生物技術(shù)公司，生產(chǎn)基于專利技術(shù)的核酸和蛋白質(zhì)純化及富集產(chǎn)品用于研究和診斷。Norgen Biotek 在2003年獲得加拿大國家研究委員會頒發(fā)的科技創(chuàng)新獎，是一家致力于樣品制備并獲得ISO 9001（產(chǎn)品質(zhì)量）、ISO 13485（產(chǎn)品可用于商業(yè)化的醫(yī)療設(shè)備，包括用于體外診斷領(lǐng)域）和ISO 15189（可用于臨床檢測機分子診斷領(lǐng)域的研發(fā)能力）認(rèn)證的生物科技公司。目前該公司的產(chǎn)品多達(dá)700余種，提供一流的樣品制備試劑盒，應(yīng)用于基因組和蛋白組等不同的領(lǐng)域。
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