胡婕慧

每逢春節(jié)十一，總能看到大批中國游客涌進日本藥妝店“爆買”漢方藥的消息！“漢方藥” 顧名思義，大多來自漢代張仲景的《傷寒雜病論》等中醫(yī)典籍。據(jù)統(tǒng)計，日本藥企加工的經(jīng)典漢方藥壟斷了世界上的中醫(yī)市場，并占據(jù)世界中藥市場的70%~80%！

國家食藥監(jiān)局相應出臺了《中藥經(jīng)典名方復方制劑簡化注冊審批管理規(guī)定(征求意見稿)》及申報資料要求(征求意見稿)，首批100個古代經(jīng)典名方的中藥復方制劑即將獲批”。新規(guī)下100個經(jīng)典名方的審批不需要提供藥效及臨床試驗資料，只需要完整的“非臨床安全性研究資料”，這將大幅縮短審批上市的時間和成本。但是新規(guī)的出臺對經(jīng)典名方生產(chǎn)各個環(huán)節(jié)的質量控制提出了更高的要求：包括指紋圖譜/特征圖譜，有效/指標成分，農(nóng)殘、真菌毒素、重金屬和有害元素等外源性污染物。質量評價既包括定性也包括定量指標，且與臨床療效相關。

如何精準地對經(jīng)典名方進行質量控制研究，賽默飛將提供高級的現(xiàn)代化分析手段，全方位助力藥材-飲片-標準煎液的質量體系構建。性能優(yōu)異的Vanquish 超高效液相色譜儀，Orbitrap超高分辨質譜儀，CompoundDiscoverer軟件，最新的Quantis/Altis串聯(lián)液質，結合TSQ8000Evo串聯(lián)氣質和元素分析類產(chǎn)品，將為經(jīng)典名方的有效性和安全性提供強有力的保障。

（一）關于藥材、飲片及“標準煎液”的質量概貌研究，藥材-飲片-“標準煎液” 指紋圖譜或特征圖譜質量相關性的綜合考慮

我們常用HPLC-UV/DAD檢測指紋圖譜的技術真的可以反映“整體質量概貌”嗎？經(jīng)典名方里都是復方制劑，涵蓋的化合物性質千差萬別，是不是非紫外吸收的成分就被遺漏了？舉個黃芪指紋圖譜的例子（圖1）），我們發(fā)現(xiàn)采用賽默飛獨有的CAD荷電氣溶膠檢測器竟然比DAD多檢測出至少10個非紫外吸收的成分，有沒有覺得CAD指紋圖譜的補充離“整體質量概貌”更近一步？ELSD也是現(xiàn)行被廣泛采用的檢測器，但我們發(fā)現(xiàn)對于同濃度竹節(jié)參的指紋圖譜分析中（圖2），CAD獲得比ELSD更高的檢測靈敏度！指紋圖譜的研究怎可少了CAD檢測的出色結果呢？

如果談到藥材-飲片-“標準煎液”指紋圖譜/特征圖譜的質量相關性，檢測靈敏度和色譜保留的重現(xiàn)性尤為重要！Vanquish UHPLC系統(tǒng)采用低色散的LightPipe^TMDAD流通池，可以在相同時間內(nèi)獲得更高的色譜峰容量和更精細的指紋圖譜；專利的進樣預壓縮技術能有效消除進樣時的壓降，保持高壓（1350Bar）條件下依然極佳的保留時間重現(xiàn)性（n=7，圖3），以上將為質量關聯(lián)性研究及多批次“標準煎液”指紋圖譜的相似度比較提供最可靠的數(shù)據(jù)！

（二）關于主要色譜峰指認，化學成分及關鍵質量屬性研究：包括化學成分結構鑒別等相關圖譜，以及與有效性、安全性、工藝相關的關鍵質量屬性指認

這項要求將“標準煎液”質控研究提升到了前所未有的高度，要求化學質控成分的指認要與療效，毒性研究和制備工藝過程相關聯(lián)。鑒定只是初步工作，對制備工藝引起化學成分變化的研究是必不可少的，即便上升到“組學”的層面來更進一步闡明起效或引起毒性的成分也不是沒有可能�；�于核磁高昂的使用和維護成本，QTOF較大的質量數(shù)測定誤差（2ppm左右甚至更大）帶來預判結果的不確定性，反觀Q Exactive系列的超高分辨質譜儀，獲得1 ppm以下的準確質量數(shù)是輕而易舉的事情，結合CompoundDiscoverer軟件強大的未知物鑒定和組學統(tǒng)計功能，必然成為研究“標準煎液”關鍵質量屬性的絕佳利器！

新版的CompoundDiscoverer軟件到底有多強呢？它可基于MS1 精細同位素匹配模式和 MS2 數(shù)據(jù)對未知成分進行精準預測，還可基于用戶自定義的碎片做相似結構化合物組的搜索，并且可以鏈接到mzCloud云譜庫（圖4），mzVault本地譜庫，Chemspider進行未知成分的鑒定。CompoundDiscoverer軟件最方便的地方在于可基于母核結構自動給出未知成分的參考結構信息（圖5），即使是新手也可輕松給出置信的鑒定結果！

CompoundDiscoverer軟件采用升級的保留時間對齊和Pooled-QC面積歸一化算法，使得不同處理的大規(guī)模樣品間的化學組分差異研究變得更簡潔明了，除了自帶的PCA, Volcano Plots和 S-Plot的可視化差異分析工具外，用戶還可以登錄iOmics Cloud云平臺進行更多更深入的統(tǒng)計差異分析甚至生物學功能的闡釋。

（三）關于藥材、飲片、“標準煎液”中可能含有的農(nóng)殘、真菌毒素、重金屬和有害元素等外源性雜質的控制限度

又回到中藥有害毒物的必檢項目。關于農(nóng)殘，賽默飛除了提供ASE加速溶劑萃取儀和QuEChERS耗材的樣品制備方案外，還提供基于15版藥典甚至高于藥典標準的GC和GCMS，LCMS的方案，TraceFinder的方法包可以即下載即用。此外還可提供16種真菌毒素三重四級桿液質的定量確證方法包和51 種真菌毒素的高分辨液質篩查方法包，以滿足客戶不同層次的測定需求。針對2015版《中國藥典》對27種中藥材及全部注射液中Pb, As, Hg, Cd, Cu和Al, Fe, Ba, Cr （規(guī)定采用ICP-MS的建議元素）的檢測要求，賽默飛可提供從低端到高端的產(chǎn)品方案，并推薦使用IC-ICP-MS聯(lián)用的新方案，正確評價中藥中砷汞的形態(tài)架態(tài)和毒性（圖7）。

中藥經(jīng)典名方的研究和申報是一項艱巨的任務，可能會面臨很多的問題和困難，需要長期不懈的努力，我們?yōu)槟�整理了賽默飛全套中藥相關解決方案，點擊賽默飛官網(wǎng)首頁頭圖及熱點活動中了解詳情。