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單細胞懸液制備儀的應(yīng)用:為單細胞測序技術(shù)提供高效的樣本前處理方案

瀏覽次數(shù):484 發(fā)布日期:2025-2-19  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

你是否還在因為手工制備單細胞懸液的繁瑣操作而耗費大量時間精力,影響實驗進度?

你是否還在面對批量制備單細胞懸液時,細胞活率有高有低,難以保證實驗結(jié)果的一致性而煩惱?

單細胞懸液制備儀適用于人和小鼠的各類細胞系、原代細胞以及干細胞的培養(yǎng)等。現(xiàn)有兩種系列的單細胞制備儀可選擇應(yīng)用,分別是JX-CKSM系列和JX-DLDXB系列。

JX-CKSM系列制備儀擁有自行研發(fā)的運動方式和大量實驗驗證的優(yōu)秀程序,針對不同細胞類型進行程序選擇,適合臨床穿刺等少量樣本,或成批做的少量樣本;實驗設(shè)備能夠?qū)崿F(xiàn)高效的批量處理,為單細胞制備提供強大助力。

JX-DLDXB系列制備儀的處理量更大,適合處理組織量大、或處理組織種類多,需要每個通道單獨運行的樣本;該實驗設(shè)備的每個管道均可獨立運行,且能輕松應(yīng)對大規(guī)模的單細胞制備任務(wù)。

針對不同的實驗,選擇適合的儀器,單細胞懸液制備儀器為科研實驗人員提供高質(zhì)量的單細胞懸液。
單細胞懸液制備的方案:



實驗案例:

1.組織取樣:采用頸椎脫位法處理小鼠后固定于手術(shù)臺,于腹部噴灑 75%乙醇消毒,對皮膚和肌肉層進行中線切口,取要制備的實驗樣本,放入1XPBS溶液中,置于冰上,清洗組織表面血液。

2.預(yù)處理:將清洗后的組織,轉(zhuǎn)移到新的1XPBS溶液或1640培養(yǎng)基中,用眼科剪剪碎至1-3mm小塊(如果是腸道樣本需剪開,用1XPBS清洗內(nèi)容物,如果制備心肌細胞,需要出生不超過3天的乳鼠)。

3.加入消化酶:選擇適合后續(xù)實驗要求的消化酶,冷水解凍,將剪碎的樣本放入消化管、加入消化酶,進行程序選擇。

4.上機選擇程序:將消化管放入儀器后,選擇合適的程序,不同的樣本均有其對應(yīng)的程序,選擇程序后,啟動儀器即可。(JX-CKSM系列需要預(yù)熱步驟,JX-DLDXB系列加熱套直接加熱,無需提前預(yù)熱)

5.終止消化、過濾、離心、重懸:下機后,用消化酶配套的終止液進行終止,終止后用細胞篩進行過濾。流式分析、單細胞測序等需要確保單獨的一個個的細胞,無細胞團,可用40um細胞篩或370-400目的紗布;原代培養(yǎng)等可用70-100um細胞篩或150-250目的紗布,在原代培養(yǎng)中有些量細胞團是可以的。過濾后采用230g的離心力,離心7min,棄上清,保留細胞沉淀,用dPBS進行重懸。

6.檢測細胞活率和得率

實驗室常用的檢測細胞得率和活率的方法有三種:
1.細胞計數(shù)儀:可用臺盼藍進行染色,用細胞計數(shù)儀檢測細胞得率和活率

2.流式分析:用死活染料進行染色(例如PI等),上流式細胞儀分析,圈門圈出死活細胞,查看細胞活率。

3.鏡檢:顯微鏡下查看細胞的狀態(tài),也可用死活染料染色,染上顏色的是死細胞,未染上的是活細胞,以此來判斷視野中細胞的活率。

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