TiYO^TM 采用光漂白LED技術(shù)，強(qiáng)力淬滅自體熒光，大幅提高信噪比，呈現(xiàn)清晰無(wú)比的熒光圖像。特別適用于處理高度自發(fā)熒光的樣本。在使用TiYO^TM時(shí)，您是否對(duì)于如何操作它還有很多的疑問(wèn)？無(wú)從下手？

當(dāng)遇到操作問(wèn)題，如何解決呢？

Q：TiYO^TM是在染色前還是染色后使用？

A：在染色前使用TiYO^TM

Q：是否只需在裝滿(mǎn)PBS的托盤(pán)中放置好組織切片就可以用TiYO^TM進(jìn)行淬滅？

A：對(duì)于自體熒光較弱的樣品，只需將其插入TiYO^TM就能獲得淬滅效果。若要獲得更充分的淬滅效果，我們建議先在室溫下用3%過(guò)氧化氫/甲醇預(yù)處理10min，PBS沖洗5min，再進(jìn)行淬滅操作。

Q：TiYO^TM可以用于活細(xì)胞嗎？

A：不可以。活細(xì)胞會(huì)受到TiYO^TM的強(qiáng)LED照射，光刺激會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，細(xì)胞即使未死亡也會(huì)受到影響。我們建議使用經(jīng)過(guò)多聚甲醛（PFA）、福爾馬林等固定后的樣品。

Q：人腦樣品進(jìn)行2h淬滅后，會(huì)出現(xiàn)管狀信號(hào)。有什么解決辦法嗎？

A：對(duì)于腦和肝組織，如果條件允許，推薦采用灌注固定的方法。此外，血細(xì)胞會(huì)發(fā)出很強(qiáng)的自體熒光，所以就排出血液而言，灌注固定是個(gè)很好的方法。如果仍有血細(xì)胞殘留，建議在灌注固定液之前先用含肝素的PBS對(duì)組織進(jìn)行一次回流沖洗。成功進(jìn)行灌注固定的關(guān)鍵在于要保持固定液處于低溫狀態(tài)。

Q：可以使用表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP）或紅色熒光蛋白（mCherry）的樣品嗎？

A：不僅自體熒光，像GFP或mCherry這樣的熒光也會(huì)被淬滅。如果您想使用表達(dá)GFP或mCherry的樣品，在淬滅后可以通過(guò)抗體染色的方法來(lái)檢測(cè)GFP或mCherry，不過(guò)這樣做可能會(huì)比較耗時(shí)。

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