熒光素酶報告基因在檢測GLP-1RA(胰高血糖素樣肽-1受體激動劑)藥物活性中起到了關鍵作用。以下是其應用原理:
首先,熒光素酶報告基因系統是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)活性的一種報告系統。當熒光素酶與熒光素底物反應時,會發出生物熒光,這種熒光信號的強度與熒光素酶的活性成正比。
在GLP-1RA藥物活性檢測中,熒光素酶報告基因系統通常與GLP-1受體(GLP-1R)的報告基因質粒結合使用。這種質粒包含了與GLP-1R基因表達相關的啟動子序列,使得當GLP-1R被激活時,可以驅動熒光素酶基因的表達。
具體檢測步驟如下:
1,將GLP-1R的報告基因質粒與熒光素酶報告基因質粒共轉染到適當的細胞系中,如293細胞。
2,將待測的GLP-1RA藥物添加到細胞培養基中,使其與細胞上的GLP-1R結合并激活。
3,如果GLP-1RA藥物能夠成功激活GLP-1R,那么與GLP-1R基因表達相關的啟動子序列就會被激活,進而驅動熒光素酶基因的表達。
4,通過添加熒光素底物并測量產生的熒光信號強度,可以評估GLP-1RA藥物的活性。熒光信號的強度反映了熒光素酶的活性,進而反映了GLP-1R的激活程度。
這種方法具有高靈敏度、高特異性和操作簡便等優點,使得研究人員能夠更準確地評估GLP-1RA藥物的活性和藥效。熒光素酶報告基因在檢測GLP-1RA藥物活性中發揮著重要作用,為藥物研發和藥效評估提供了有力的工具。
CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性,應用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規模啟動子功能測定、信號通路等研究。
逐典螢光素酶報告基因
針對報告基因檢測不同的側重需求,逐典推出了3種檢測系統。
逐典螢光素酶報告基因優勢:
1. 檢測靈敏度高,信號穩定性好
HEK293-NFK B-LUC細胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強型、超敏型、穩定型檢測試劑進行信號檢測。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細胞即可。
3. 穩定性好
同時在10次反復凍融實驗中,逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強的穩定性。