全能核酸酶可以降解所有形式的DNA和RNA,將它們消化成3-8個堿基長度的5-單磷酸寡核苷酸,且不具有堿基識別特異性。在生物技術和生物制藥領域中扮演著重要的角色,尤其是在生物蛋白藥的生產過程中,科研中常用于在蛋白樣品制備和純化工藝的改善、提高蛋白產量等方面;隨著生物藥的快速發展和應用,全能核酸酶廣泛應用于去除疫苗樣品、細胞和基因治療病毒樣品及重組蛋白藥物中的核酸污染,降低核酸殘留毒性風險,提高產品安全性。
在生物蛋白藥的生產過程中,全能核酸酶主要用于以下幾個方面:
1,基因克隆與表達:
全能核酸酶被用于構建基因克隆載體,如質粒或病毒載體。這些載體用于將目標基因引入宿主細胞,以實現生物蛋白的高效表達。通過切割和連接DNA片段,全能核酸酶幫助研究人員構建包含目標基因的表達系統。
2,基因組編輯:
隨著CRISPR-Cas9等技術的興起,全能核酸酶在基因組編輯中發揮了重要作用。這些酶可以精確地切割基因組中的特定序列,為研究人員提供修改基因、插入或刪除特定基因片段的工具。
通過基因組編輯,研究人員可以優化生物蛋白的生產途徑,提高產量或改善其生物活性。
3,去除核酸雜質:
在生物蛋白的純化過程中,全能核酸酶可用于去除殘留的DNA和RNA雜質。這些雜質可能會干擾生物蛋白的純度和活性,因此需要在最終產品前去除。
全能核酸酶的選擇性切割作用使得它們成為純化過程中的有效工具,確保生物蛋白藥的純度和質量。
4,轉錄后修飾:
對于某些生物蛋白藥,其活性可能依賴于特定的轉錄后修飾。全能核酸酶在RNA加工和修飾過程中可能起到關鍵作用,如參與mRNA的剪接、修飾和穩定性調控。
5,安全性提升:
通過去除可能引發免疫反應的核酸雜質,全能核酸酶有助于提升生物蛋白藥的安全性。
在生產過程中使用全能核酸酶可以確保最終產品的純凈度,降低患者使用時的風險。
總之,全能核酸酶在生物蛋白藥的生產過程中扮演著重要角色,從基因克隆、基因組編輯、去除核酸雜質到轉錄后修飾等多個環節都發揮著關鍵作用。這些作用共同確保了生物蛋白藥的高效、安全生產。
逐典Pannarase全能核酸酶優勢:
1.無動物源性、無氨芐青霉素
2.杰出單位比酶活、更高效的核酸降解能力
3.先進的生產工藝,非傳統His標簽純化、排除引入金屬離子風險
4.嚴格的質控標準,內毒水平低,確保單位酶活的準確性以及批次間穩定性
全能核酸酶應用條件:
全能核酸酶的酶活會受到多種因素的影響(例如溫度、pH、離子強度等),故用量范圍也會從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作環境下酶的最佳濃度不同,需要通過實驗設置梯度進行最佳條件的摸索。
應用實例:
1.樣品:狂犬病毒濃縮液
處理條件:核酸酶濃度50~90U/ml ,
37 ℃處理 2 h,轉入18 ~ 26 ℃處理 6h
2.樣品:狂犬病病毒濃縮液
處理條件:25、50和100 U/ml,37℃
3.樣品:流感病毒濃縮液
處理條件:10 U/mL,37℃