隨著生物醫藥行業的迅猛發展，越來越多的生物制品正逐步應用于人類健康的維護與治療，其中包括治療性抗體藥物、細胞治療以及病毒載體疫苗等，這些產品的需求呈現出快速增長的趨勢。與傳統口服類藥物相比，生物制品通常通過注射等方式直接進入人體，因此，對其安全性和有效性提出了更高要求。其中，宿主核酸殘留作為潛在的傳染性和致瘤性風險，成為生物制品安全監管中至關重要的環節。
 

一、HCD殘留控制的法規要求

世界衛生組織（WHO）、國家藥品監督管理局藥品評審中心（CDE）以及各國政府均針對生物制品中宿主核酸殘留制定了嚴格的標準和規定。例如，疫苗和治療類生物制品中的DNA殘留量通常被嚴格控制在每劑量100pg以下，《體內基因治療產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）》中建議：“如有可能，建議盡量將殘留DNA控制在10ng/劑以內，DNA殘留片段的大小控制在200bp以下。”
 

表一.《中國藥典》(2020版)部分生物制品殘留DNA限度要求

二、HCD殘留控制的挑戰

全能核酸酶，又稱非限制性核酸內切酶，是一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內切酶，可以降解各種形式的（雙鏈，單鏈，線狀，環狀，天然或變性）DNA和RNA，已廣泛應用于上市藥品生產過程中的宿主核酸控制。雖然在生理鹽條件下的體外水解實驗中，這類酶可以迅速降解宿主DNA，但在復雜的工藝條件下使用仍面臨著眾多挑戰。

1、宿主DNA通常以染色質形式存在，易被蛋白質包裹，導致DNA難以暴露。但在高鹽環境下，核酸與蛋白質可有效分離，從而使核酸去除更加簡便。

2、對于AAV等病毒載體，會因為靜電相互作用而發生聚集，這種聚集會降低病毒穩定性，從而影響得率，因此提高鹽濃度，可以有效減少AAV病毒顆粒的聚集，從而提高其得率。

3、在純化的工藝過程中，有些需要利用高鹽洗脫的層析樣品，其宿主細胞核酸含量偏高，則需要采取相應措施降低宿主核酸含量。

除此之外，傳統全能核酸酶的活性會隨著鹽濃度升高而急劇下降，在中、高鹽條件使用這類核酸酶會造成生產成本顯著增加。

三、逐典耐高鹽全能核酸酶，不同鹽濃度耐受，總有一款適合您！

Pannarase耐高鹽全能核酸酶

Pannarase在150 mM Na+濃度條件下酶活性最高

圖1.Pannarase耐高鹽全能核酸酶耐鹽曲線

圖2.Pannarase耐高鹽全能核酸酶酶切數據

Pannarase耐高鹽全能核酸酶（SAN），更高鹽耐受型

Pannarase耐高鹽全能核酸酶（SAN），更高鹽耐受型在600~700 mM Na+濃度條件下酶活性最高

圖3.Pannarase耐高鹽全能核酸酶（SAN），更高鹽耐受型耐鹽曲線

圖4.Pannarase耐高鹽全能核酸酶（SAN），更高鹽耐受型酶切數據